| Ім'я | Номер статті | Специфікація | Умови зберігання | Термін придатності |
| Магнітні кульки MaxSortin® для розділення CD4 | TL-623 | 2 мл на 1×10⁹ загальної кількості клітин | 2 - 8 °C | 6 місяців |
| Буфер для сортування клітин MaxSortin® | MS-BF100 | 100 мл | 2 - 8 °C | 12 місяців |
| Колонка MaxSortin® L-подібного типу | MS-CL01 | 1 штука | 10 - 35 °C | 12 місяців |
Реактивні видиЛюдина
Ендотоксин з магнітними кульками
Зовнішній вигляд магнітних намистинокКоричнева рідина
Набір MaxSortin® для розділення CD4 може бути використаний для сортування людських CD4+ Т-клітин. Сортування CD4+ Т-клітин можна досягти шляхом інкубації нанорозмірних магнітних кульок для розділення CD4 з клітинами. Нанорозмірні магнітні кульки для розділення CD4 інкубуються з мононуклеарними клітинами периферичної крові (PBMC), а потім піддаються магнітній сепарації, що дозволяє розділяти та збагачувати CD4+ Т-клітини, відіграючи роль в очищенні CD4+ Т-клітин і застосовується для виробництва продуктів клітинної терапії.
1. Ресуспендуйте людські PBMC у буфері PBS, що містить 1% людського сироваткового альбуміну (HSA). Візьміть зразок для підрахунку та перенесіть 1×10⁷ клітин у пробірку EP об'ємом 1,5 мл. Потім центрифугуйте при 1500 об/хв протягом 5 хвилин.
2. Злийте супернатант, візьміть 80 мкл буфера для сортування клітин MaxSortin® для ресуспендування клітин, додайте 20 мкл магнітних кульок для розділення CD4, добре перемішайте, а потім помістіть їх у холодильник при температурі 2-8 °C для інкубації протягом 15 хвилин.
3. Візьміть колонку MaxSortin® L-Separation та помістіть її на сортувальник клітин з магнітною активацією (MACS) і двічі промийте її 1 мл буфера для сортування клітин MaxSortin®.
4. Вийміть зразок, що завершив інкубацію, з холодильника при температурі 2–8 °C, додайте 1 мл розчину MACS, центрифугуйте при 1500 об/хв протягом 5 хвилин та видаліть супернатант.
5. Додайте 1 мл буфера для сортування клітин MaxSortin® для ресуспендування клітин, додайте зразок у колонку для розділення. Після того, як він витече природним шляхом, додайте буфер для сортування клітин MaxSortin® двома порціями, по 1 мл кожна. Зберіть ефлюент у центрифужну пробірку об'ємом 15 мл.
6. Після того, як весь буфер для сортування клітин MaxSortin® витече, вийміть розділову колонку з сортувальника MACS та помістіть її в іншу нову центрифужну пробірку об'ємом 15 мл. Додайте 3 мл буфера для сортування клітин MaxSortin® у розділову колонку та використовуйте поршень, що постачається з роздільною колонкою, щоб виштовхнути рідину безпосередньо.
7. Помістіть пробірку для центрифуги об'ємом 15 мл із зібраною рідиною в горизонтальну центрифугу та центрифугуйте при 1500 об/хв протягом 5 хвилин.
8. Після центрифугування злийте супернатант, візьміть 1 мл 1× розчину фосфатно-сольового буфера Дульбекко (DPBS) для ресуспендування клітин, підрахуйте клітини та проведіть детекцію проточною цитометрією.
Під час інкубації магнітних кульок з клітинами необхідно ретельно їх перемішати для покращення ефективності сортування.
