MaxSortin® CD4 izolýasiýa toplumy

“MaxSortin® CD4 Aýralyk toplumy” adam CD4 + T öýjüklerini tertiplemek üçin ulanylyp bilner. Nanoskale CD4 bölüji magnit monjuklary öýjükler bilen inkubasiýa etmek arkaly CD4 + T öýjüklerini tertipleşdirip bolýar. Nanoskale CD4 bölüji magnit monjuklar periferiýa gan mononukleer öýjükleri (PBMCs) bilen inkubasiýa edilýär we CD4 + T öýjüklerini arassalamakda rol oýnaýan we öýjük bejeriş önümleriniň önümçiliginde ulanylýan magnit bölünişige sezewar edilýär.

1. Adamyň PBMC-lerini 1% adam serum albuminini (HSA) öz içine alýan PBS buferinde gaýtadan işlediň. 1 × 10⁷ öýjükleri sanamak we 1,5 ml EP turbasyna geçirmek üçin nusga alyň. Soňra 1500 aýlawda 5 minutlap sentrifuga.
2. Adatdan daşary tebigaty taşlaň, öýjükleri täzeden dikeltmek üçin 80 μL MaxSortin® öýjük sortlaýyş buferini alyň, 20 μL CD4 bölüji magnit monjuk goşuň, gowy garyşdyryň we 15 minut inkubasiýa üçin 2 - 8 ° C sowadyjyda goýuň.
3.
4. 2 - 8 ° C-de sowadyjydan inkubasiýa gutaran nusgany alyň, 1 ml MACS erginini goşuň, 1500 rpm-de sentrifuga 5 minut goşuň we adatdan daşary tebigaty taşlaň.
5. Öýjükleri täzeden gurmak, nusgany aýralyk sütünine goşmak üçin 1 ml MaxSortin® öýjük sortlaýyş buferini goşuň. Tebigy çykandan soň, her gezek 1 ml iki bölege MaxSortin® öýjük sortlaýyş buferini goşuň. Suwy 15 ml sentrifuga turbasynda ýygnaň.
6. MaxSortin® öýjükleri tertipleşdirmek buferi çykandan soň, MACS sortlaýjysyndan aýralyk sütünini aýyryň we başga 15 ml merkezden gaçyryş turbasyna ýerleşdiriň. Aýralyk sütünine 3 ml MaxSortin® öýjük sortlaýyş buferini goşuň we suwuklygy göni çykarmak üçin aýralyk sütüni bilen gelýän porşini ulanyň.
7. Collectedygnalan suwuklygy öz içine alýan 15 ml sentrifuga turbasyny keseligine merkezden gaçyryş merkezine we sentrifuga 1500 aýlawda 5 minut goýuň.
8. Merkezden gaçyryşdan soň, adatdan daşary tebigaty döküň, öýjükleri täzeden dikeltmek, öýjükleri sanamak we akym sitometriýasyny anyklamak üçin 1 ml Dulbecco-nyň fosfat-buferli duzly (DPBS) erginini alyň.