Leave Your Message
หมวดหมู่สินค้า
สินค้าแนะนำ

ชุดแยก MaxSortin® CD4

สต๊อก: มีในสต๊อก
รุ่น : TL-623KIT

    ชื่อ หมายเลขบทความ ข้อมูลจำเพาะ เงื่อนไขการจัดเก็บ อายุการเก็บรักษา
    ลูกปัดแม่เหล็กแยก CD4 MaxSortin® ทีแอล-623 2 มล. สำหรับเซลล์ทั้งหมด 1×10⁹ 2 - 8 องศาเซลเซียส 6 เดือน
    บัฟเฟอร์การเรียงลำดับเซลล์ MaxSortin® เอ็มเอส-บีเอฟ100 100 มล. 2 - 8 องศาเซลเซียส 12 เดือน
    คอลัมน์แยกตัว L MaxSortin® เอ็มเอส-ซีแอล01 1 ชิ้น 10 - 35 องศาเซลเซียส 12 เดือน

     

    รายละเอียดสินค้า

     

    สายพันธุ์ที่ตอบสนอง: มนุษย์

    เอ็นโดทอกซินเม็ดแม่เหล็ก:

    ลักษณะลูกปัดแม่เหล็ก:ของเหลวสีน้ำตาล

     

    วัตถุประสงค์การใช้

    ชุดแยก MaxSortin® CD4 สามารถใช้ในการคัดแยกเซลล์ T CD4+ ของมนุษย์ได้ การเพาะเลี้ยงเม็ดแม่เหล็กแยก CD4 ขนาดนาโนกับเซลล์จะทำให้สามารถคัดแยกเซลล์ T CD4+ ได้ เม็ดแม่เหล็กแยก CD4 ขนาดนาโนจะถูกเพาะเลี้ยงร่วมกับเซลล์โมโนนิวเคลียร์ในเลือดส่วนปลาย (PBMC) จากนั้นจึงนำไปแยกด้วยแม่เหล็ก ซึ่งทำให้สามารถแยกและเพิ่มจำนวนเซลล์ T CD4+ ได้ ซึ่งมีบทบาทในการทำให้เซลล์ T CD4+ บริสุทธิ์ และนำไปใช้ในการผลิตผลิตภัณฑ์บำบัดเซลล์ได้

     

    คำแนะนำการใช้งาน

     

    ขั้นตอนการทดลอง

    1. แขวนลอย PBMC ของมนุษย์ในบัฟเฟอร์ PBS ที่มีอัลบูมินในซีรั่มของมนุษย์ 1% (HSA) นำตัวอย่างไปนับและถ่ายโอนเซลล์ 1×10⁷ ลงในหลอด EP ขนาด 1.5 มล. จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 1,500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 5 นาที
    2. ทิ้งของเหลวส่วนบนออก ใช้บัฟเฟอร์คัดแยกเซลล์ MaxSortin® ปริมาตร 80 μL เพื่อทำให้เซลล์กลับมาแขวนลอยอีกครั้ง เติมลูกปัดแม่เหล็กแยก CD4 ปริมาตร 20 μL ผสมให้เข้ากัน แล้วนำไปวางไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ 2-8 °C เพื่อฟักเป็นเวลา 15 นาที
    3. นำคอลัมน์การแยก MaxSortin® L วางไว้บนเครื่องคัดแยกเซลล์แบบเปิดใช้งานด้วยแม่เหล็ก (MACS) แล้วล้างด้วยบัฟเฟอร์คัดแยกเซลล์ MaxSortin® 1 มล. สองครั้ง
    4. นำตัวอย่างที่ฟักเสร็จแล้วออกจากตู้เย็นที่อุณหภูมิ 2-8 °C เติมสารละลาย MACS 1 มล. ปั่นเหวี่ยงที่ความเร็ว 1,500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 5 นาที แล้วทิ้งส่วนที่เป็นของเหลวใสออกไป
    5. เติมบัฟเฟอร์คัดแยกเซลล์ MaxSortin® 1 มล. เพื่อทำให้เซลล์กลับมาแขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นใส่ตัวอย่างลงในคอลัมน์แยก เมื่อตัวอย่างไหลออกมาตามธรรมชาติแล้ว ให้เติมบัฟเฟอร์คัดแยกเซลล์ MaxSortin® เป็น 2 ส่วน ครั้งละ 1 มล. เก็บน้ำเสียในหลอดเหวี่ยงขนาด 15 มล.
    6. หลังจากบัฟเฟอร์คัดแยกเซลล์ MaxSortin® ไหลออกมาจนหมดแล้ว ให้ถอดคอลัมน์แยกออกจากเครื่องคัดแยก MACS แล้วใส่ลงในหลอดเหวี่ยงใหม่ขนาด 15 มล. เติมบัฟเฟอร์คัดแยกเซลล์ MaxSortin® 3 มล. ลงในคอลัมน์แยก แล้วใช้ลูกสูบที่แถมมากับคอลัมน์แยกเพื่อดันของเหลวออกโดยตรง
    7. วางหลอดเหวี่ยงขนาด 15 มล. ที่บรรจุของเหลวที่เก็บรวบรวมไว้ลงในเครื่องเหวี่ยงแนวนอน และเหวี่ยงที่ความเร็ว 1,500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 5 นาที
    8. หลังจากการปั่นเหวี่ยง ให้เทส่วนที่เป็นของเหลวใสออก แล้วนำสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ซาไลน์ (DPBS) ของ 1× Dulbecco จำนวน 1 มิลลิลิตร ไปทำให้เซลล์กลับมาแขวนลอยอีกครั้ง นับเซลล์ และตรวจวัดการไหลเวียนของเซลล์

     

    ข้อควรระวัง

    เมื่อฟักลูกปัดแม่เหล็กกับเซลล์ จำเป็นต้องผสมให้เข้ากันเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการคัดแยก