| Namn | Artikelnummer | Specifikation | Lagringsförhållanden | Hållbarhet |
| MaxSortin® CD4-separationsmagnetiska pärlor | TL-623 | 2 ml för 1×10⁹ totalt antal celler | 2–8 °C | 6 månader |
| MaxSortin® cellsorteringsbuffert | MS-BF100 | 100 ml | 2–8 °C | 12 månader |
| MaxSortin® L-separationskolonn | MS-CL01 | 1 styck | 10–35 °C | 12 månader |
Reaktiva arter: Människa
Magnetisk pärl-endotoxin
Utseende på magnetiska pärlorBrun vätska
MaxSortin® CD4-separationskitet kan användas för att sortera humana CD4+ T-celler. Genom att inkubera nanoskaliga CD4-separationsmagnetiska pärlor med celler kan sortering av CD4+ T-celler uppnås. De nanoskaliga CD4-separationsmagnetiska pärlorna inkuberas med perifera mononukleära blodceller (PBMC) och utsätts sedan för magnetisk separation, vilket möjliggör separation och anrikning av CD4+ T-celler, vilket spelar en roll i reningen av CD4+ T-celler och är tillämpligt för produktion av cellterapiprodukter.
1. Resuspendera humana PBMC i PBS-buffert innehållande 1 % humant serumalbumin (HSA). Ta ett prov för räkning och överför 1×10⁷ celler till ett 1,5 ml EP-rör. Centrifugera sedan vid 1500 rpm i 5 minuter.
2. Kassera supernatanten, ta 80 μL MaxSortin® Cell Sorting Buffer för att resuspendera cellerna, tillsätt 20 μL CD4-separationsmagnetiska pärlor, blanda väl och placera dem sedan i kylskåp vid 2–8 °C för inkubation i 15 minuter.
3. Ta MaxSortin® L-separationskolonnen och placera den på den magnetiskt aktiverade cellsorteringsenheten (MACS) och skölj den två gånger med 1 ml MaxSortin® cellsorteringsbuffert.
4. Ta ut det inkuberade provet ur kylskåpet vid 2–8 °C, tillsätt 1 ml MACS-lösning, centrifugera vid 1500 rpm i 5 minuter och kassera supernatanten.
5. Tillsätt 1 mL MaxSortin® Cell Sorting Buffer för att resuspendera cellerna och tillsätt provet i separationskolonnen. När det har flytit ut naturligt, tillsätt MaxSortin® Cell Sorting Buffer i två portioner, 1 mL åt gången. Samla upp utflödet i ett 15 mL centrifugrör.
6. När all MaxSortin® Cell Sorting Buffer har runnit ut, ta bort separationskolonnen från MACS-sorteraren och placera den i ett nytt 15 ml centrifugrör. Tillsätt 3 ml MaxSortin® Cell Sorting Buffer i separationskolonnen och använd kolven som medföljer separationskolonnen för att trycka ut vätskan direkt.
7. Placera 15 ml-centrifugröret med den uppsamlade vätskan i en horisontell centrifug och centrifugera vid 1500 rpm i 5 minuter.
8. Efter centrifugering, häll ut supernatanten, ta 1 mL av 1× Dulbeccos fosfatbuffrade saltlösning (DPBS) för att resuspendera cellerna, räkna cellerna och utför flödescytometridetektion.
Vid inkubering av magnetiska pärlor med celler är det nödvändigt att blanda dem noggrant för att förbättra sorteringseffektiviteten.
