Реактивне врстеЧовек
Ендотоксин
Изглед: Смеђа течност
Реагенс за активацију Т ћелија ActCel се синтетише спајањем наноматрице са анти-људским CD3 антителом и анти-људским CD28 антителом, и може нежно и ефикасно активирати Т ћелије или PBMC (периферне крвне мононуклеарне ћелије).
Експерименталне процедуре:
1.1 Спроведите експеримент у титру 1:200. Специфичне количине додатка су приказане у следећој табели:
| Плоча за културу | Максимална запремина културе | Укупан број Т ћелија | Запремина реагенса за активацију Т ћелија додатог по бунарићу |
| 96-бунарни | 0,2 мл | 0,3×10⁶ | 1 μL |
| 48 бунара | 1 мл | 1×10⁶ | 5 μL |
| 24-бунарни | 2 мл | 2×10⁶ | 10 μL |
| 12 бунара | 4 мл | 4×10⁶ | 20 μL |
| 6-бунарни | 5 мл | 5×10⁶ | 25 μL |
1.2 Узимајући 1×10⁶ Т ћелија као пример: Додајте 995 μL X-VIVOTM 15 медијума и 5 μL реагенса за активацију Т ћелија (који садржи 200 IU/mL IL-2) у 1×10⁶ Т ћелија. Затим их култивишите на 37 °C под 5% CO₂ током 2 дана.
1.3 Након култивације од 2-3 дана, центрифугирајте на 300g током 10 минута, уклоните супернатант и додајте 2 mL свеже комплетне подлоге да бисте уклонили реагенс за активацију Т ћелија. Затим наставите са култивацијом на 37 °C под 5% CO₂.
1.4 Свака 2 дана, темељно пипетирајте ћелијску суспензију да се равномерно промеша, додајте двоструку запремину свеже комплетне подлоге (однос оригиналне запремине и додатне запремине је 1:2) и пребројте ћелије да бисте израчунали фактор амплификације. Затим их култивишите у инкубатору на 37 °C, 5% CO₂. На пример, ако се подлога допуни 4. дана, а оригинална запремина је 2 mL, треба додати 4 mL подлоге, а коначна укупна запремина ће бити 6 mL.
- Приликом инкубације реагенса за активацију Т ћелија са ћелијама, неопходно их је темељно промешати како би се побољшала ефикасност активације.
- Титар реагенса за активацију Т ћелија може се подесити у опсегу од 1:100 - 300.
- Време центрифугирања ради уклањања реагенса за активацију Т ћелија може се оптимизовати према захтевима купца.
Овај производ је применљив само за ин витро ћелијску културу и не може се директно користити за клинички третман.