Ituaiga Reactive: Tagata
Endotoxin:
Fa'aaliga: Suava lanu enaena
O le ActCel T Cell Activation Reagent e faʻapipiʻiina e ala i le tuʻufaʻatasia o se nanomatrix ma anti-human CD3 antibody ma anti-human CD28 antibody, ma e mafai ona faʻagaoioia lemu ma le lelei o sela T poʻo PBMCs (Peripheral Blood Mononuclear Cells).
Faiga Fa'ata'ita'i:
1.1 Fa'atino le su'ega ile titer ole 1:200. O aofa'iga fa'aopoopo fa'apitoa o lo'o fa'aalia i le siata lenei:
| Papatusi Aganuu | Tulaga maualuga Volume | Numera T Cell Tele | Volume ole T Cell Activation Reagent Faaopoopo ile Vaieli |
| 96-lelei | 0.2 mL | 0.3×10⁶ | 1 μL |
| 48-lelei | 1 mL | 1×10⁶ | 5 μL |
| 24-lelei | 2 mL | 2×10⁶ | 10 μL |
| 12-lelei | 4 mL | 4×10⁶ | 20 μL |
| 6-lelei | 5 ml | 5×10⁶ | 25 μL |
1.2 Ave 1 × 10⁶ T sela e fai ma faʻataʻitaʻiga: Faʻaopoopo le 995 μL o le X-VIVOTM 15 medium ma le 5 μL o le T cell activation reagent (o loʻo i ai le 200 IU/mL IL-2) i le 1 × 10⁶ T sela. Ona fa'atupuina lea i le 37 °C i lalo ole 5% CO₂ mo le 2 aso.
1.3 A maeʻa le faʻatupuina mo le 2 - 3 aso, faʻapipiʻi i le 300g mo le 10 minute, aveese le supernatant, ma faʻaopopo le 2 mL fou fou e aveese ai le T cell activation reagent. Ona fa'aauau lea o le fa'atupuina i le 37 °C i lalo ole 5% CO₂.
1.4 Ta'i 2 aso uma, paipa le fa'agata sela ina ia fa'afefiloi lelei, fa'aopoopo fa'alua le voluma o le fou fou (o le fua o le ulua'i voluma i le voluma fa'aopoopo o le 1:2), ma faitau sela e fa'atatau ai le fa'aopoopoga o mea. Ona fa'atupuina lea i totonu o se incubator 37 °C, 5% CO₂. Mo se faʻataʻitaʻiga, afai e faʻaopoopo le alalaupapa i le aso 4, ma o le uluaʻi voluma e 2 mL, e tatau ona faʻaopoopo le 4 mL o le alalaupapa, ma o le aofaʻi atoa mulimuli o le 6 mL.
- Pe a incubating le T cell activation reagent ma sela, e tatau ona faʻafefiloi maeʻaeʻa e faʻaleleia ai le faʻamalosia lelei.
- Ole titer ole T cell activation reagent e mafai ona fetuutuunai ile va ole 1:100 - 300.
- Le taimi mo centrifuging e aveese le T cell activation reagent e mafai ona optimized e tusa ai ma manaoga o tagata faatau.
O lenei oloa e na'o le fa'aoga i le in vitro cell culture ma e le mafai ona fa'aoga sa'o mo togafitiga fa'afoma'i.