| Ime | Številka artikla | Specifikacija | Pogoji shranjevanja | Rok uporabnosti |
| Magnetne kroglice MaxSortin® za ločevanje CD4 | TL-623 | 2 mL za 1 × 10⁹ celic skupaj | 2–8 °C | 6 mesecev |
| MaxSortin® pufer za sortiranje celic | MS-BF100 | 100 ml | 2–8 °C | 12 mesecev |
| MaxSortin® L-ločilna kolona | MS-CL01 | 1 kos | 10–35 °C | 12 mesecev |
Reaktivne vrsteČlovek
Endotoksin z magnetnimi kroglicami
Videz magnetnih kroglic: Rjava tekočina
Komplet za ločevanje CD4 MaxSortin® se lahko uporablja za sortiranje človeških celic CD4+ T. Z inkubacijo nanoskalnih magnetnih kroglic za ločevanje CD4 s celicami je mogoče doseči sortiranje celic CD4+ T. Nanoskalne magnetne kroglice za ločevanje CD4 se inkubirajo z mononuklearnimi celicami periferne krvi (PBMC) in nato podvržejo magnetni ločitvi, ki omogoča ločevanje in obogatitev celic CD4+ T, kar ima vlogo pri čiščenju celic CD4+ T in je uporabno za proizvodnjo izdelkov za celično terapijo.
1. Resuspendirajte človeške PBMC v PBS pufru, ki vsebuje 1 % humanega serumskega albumina (HSA). Vzemite vzorec za štetje in prenesite 1 × 10⁷ celic v 1,5 mL EP epruveto. Nato centrifugirajte pri 1500 vrt/min 5 minut.
2. Supernatant zavrzite, vzemite 80 μL pufra za sortiranje celic MaxSortin® za resuspendiranje celic, dodajte 20 μL magnetnih kroglic za ločevanje CD4, dobro premešajte in nato celice postavite v hladilnik pri temperaturi od 2 do 8 °C za 15 minut inkubacije.
3. Vzemite kolono MaxSortin® L-Separation in jo postavite na sorter za magnetno aktivirano celično sortiranje (MACS) ter jo dvakrat sperite z 1 mL pufra za celično sortiranje MaxSortin®.
4. Vzorec, ki je bil inkubiran, vzemite iz hladilnika pri 2–8 °C, dodajte 1 ml raztopine MACS, centrifugirajte pri 1500 vrt/min 5 minut in zavrzite supernatant.
5. Dodajte 1 mL pufra za sortiranje celic MaxSortin® za resuspendiranje celic in vzorec dodajte v ločevalno kolono. Ko vzorec naravno izteče, dodajte pufer za sortiranje celic MaxSortin® v dveh delih, po 1 mL. Iztok zberite v 15 mL centrifugalno epruveto.
6. Ko izteče ves pufer za sortiranje celic MaxSortin®, odstranite ločevalno kolono iz sorterja MACS in jo postavite v novo 15-mililitrsko centrifugalno epruveto. V ločevalno kolono dodajte 3 ml pufra za sortiranje celic MaxSortin® in z batom, ki je priložen ločevalni koloni, tekočino neposredno iztisnite ven.
7. 15-mililitrsko centrifugalno epruveto z zbrano tekočino postavite v horizontalno centrifugo in centrifugirajte pri 1500 vrt/min 5 minut.
8. Po centrifugiranju odlijte supernatant, vzemite 1 mL 1× Dulbeccove fosfatno pufrirane fiziološke raztopine (DPBS) za resuspendiranje celic, preštejte celice in izvedite pretočno citometrično detekcijo.
Pri inkubaciji magnetnih kroglic s celicami jih je treba temeljito premešati, da se izboljša učinkovitost sortiranja.
