| Meno | Číslo článku | Špecifikácia | Podmienky skladovania | Trvanlivosť |
| Magnetické guľôčky MaxSortin® na separáciu CD4 | TL-623 | 2 ml na 1 × 10⁹ celkový počet buniek | 2 – 8 °C | 6 mesiacov |
| MaxSortin® bunkový triediaci pufor | MS-BF100 | 100 ml | 2 – 8 °C | 12 mesiacov |
| Separačná kolóna MaxSortin® L | MS-CL01 | 1 kus | 10 – 35 °C | 12 mesiacov |
Reaktívne druhyČlovek
Magnetický guľôčkový endotoxín
Vzhľad magnetických guľôčokHnedá kvapalina
Súprava na separáciu CD4 MaxSortin® sa môže použiť na triedenie ľudských CD4+ T buniek. Triedenie CD4+ T buniek je možné dosiahnuť inkubáciou nanorozmerných magnetických guľôčok na separáciu CD4 s bunkami. Nanorozmerné magnetické guľôčky na separáciu CD4 sa inkubujú s periférnymi mononukleárnymi bunkami krvi (PBMC) a potom sa podrobia magnetickej separácii, ktorá umožňuje separáciu a obohatenie CD4+ T buniek, pričom zohrávajú úlohu pri čistení CD4+ T buniek a sú použiteľné na výrobu produktov bunkovej terapie.
1. Resuspendujte ľudské PBMC v PBS pufri obsahujúcom 1 % ľudského sérového albumínu (HSA). Odoberte vzorku na spočítanie a preneste 1 × 10⁷ buniek do 1,5 ml EP skúmavky. Potom centrifugujte pri 1500 ot./min. počas 5 minút.
2. Supernatant zlikvidujte, odoberte 80 μl MaxSortin® Cell Sorting Buffer na resuspendovanie buniek, pridajte 20 μl magnetických guľôčok na separáciu CD4, dobre premiešajte a potom ich vložte do chladničky pri teplote 2 – 8 °C na inkubáciu počas 15 minút.
3. Vezmite kolónu MaxSortin® L-Separation a umiestnite ju na magneticky aktivovaný triedič buniek (MACS) a dvakrát ju prepláchnite 1 ml pufru na triedenie buniek MaxSortin®.
4. Vyberte vzorku, ktorá bola inkubovaná, z chladničky pri teplote 2 – 8 °C, pridajte 1 ml roztoku MACS, centrifugujte pri 1500 ot./min. počas 5 minút a supernatant zlikvidujte.
5. Pridajte 1 ml pufru na triedenie buniek MaxSortin® na resuspendovanie buniek a pridajte vzorku do separačnej kolóny. Po prirodzenom vytečení pridajte pufor na triedenie buniek MaxSortin® v dvoch dávkach, vždy 1 ml. Výtok zachytite do 15 ml centrifugačnej skúmavky.
6. Po vytečení všetkého pufru na triedenie buniek MaxSortin® vyberte separačnú kolónu z triediča MACS a vložte ju do inej novej 15 ml centrifugačnej skúmavky. Do separačnej kolóny pridajte 3 ml pufru na triedenie buniek MaxSortin® a pomocou piestu, ktorý je súčasťou separačnej kolóny, vytlačte kvapalinu priamo von.
7. Vložte 15 ml centrifugačnú skúmavku so zachytenou kvapalinou do horizontálnej centrifúgy a centrifugujte pri 1500 ot./min. počas 5 minút.
8. Po centrifugácii vylejte supernatant, odoberte 1 ml 1× Dulbeccovho fosfátom pufrovaného fyziologického roztoku (DPBS) na resuspendovanie buniek, spočítajte bunky a vykonajte prietokovú cytometriu.
Pri inkubácii magnetických guľôčok s bunkami je potrebné ich dôkladne premiešať, aby sa zlepšila účinnosť triedenia.
