Leave Your Message

Kit de izolare CD4 MaxSortin®

Stoc: În stoc
Model: TL-623KIT

    Nume Număr articol Specificații Condiții de depozitare Termen de valabilitate
    Bile magnetice de separare MaxSortin® CD4 TL-623 2 mL pentru 1×10⁹ celule totale 2 - 8 °C 6 luni
    Tampon de sortare celulară MaxSortin® MS-BF100 100 ml 2 - 8 °C 12 luni
    Coloană de separare MaxSortin® L MS-CL01 1 bucată 10 - 35 °C 12 luni

     

    Detalii produs

     

    Specii reactiveOm

    Endotoxină cu perle magnetice

    Aspectul mărgelei magneticeLichid maro

     

    Utilizare preconizată

    Kitul de separare MaxSortin® CD4 poate fi utilizat pentru sortarea celulelor T CD4+ umane. Prin incubarea sferelor magnetice de separare CD4 la scară nanometrică cu celule, se poate realiza sortarea celulelor T CD4+. Sferele magnetice de separare CD4 la scară nanometrică sunt incubate cu celule mononucleare din sângele periferic (PBMC) și apoi supuse separării magnetice, ceea ce permite separarea și îmbogățirea celulelor T CD4+, jucând un rol în purificarea celulelor T CD4+ și fiind aplicabil în producerea de produse de terapie celulară.

     

    Instrucțiuni de utilizare

     

    Proceduri experimentale

    1. Resuspendați celulele mononucleare de sânge (PBMC) umane în tampon PBS care conține 1% albumină serică umană (HSA). Luați o probă pentru numărare și transferați 1×10⁷ celule într-un tub EP de 1,5 mL. Apoi centrifugați la 1500 rpm timp de 5 minute.
    2. Aruncați supernatantul, luați 80 μL de soluție tampon de sortare celulară MaxSortin® pentru a resuspenda celulele, adăugați 20 μL de sfere magnetice de separare CD4, amestecați bine și apoi introduceți-le la frigider la 2 - 8 °C pentru incubare timp de 15 minute.
    3. Luați coloana de separare MaxSortin® L și plasați-o pe sortatorul de sortare celulară activat magnetic (MACS) și clătiți-o de două ori cu 1 ml de soluție tampon de sortare celulară MaxSortin®.
    4. Scoateți proba care a fost incubată complet din frigider la 2 - 8 °C, adăugați 1 mL de soluție MACS, centrifugați la 1500 rpm timp de 5 minute și aruncați supernatantul.
    5. Adăugați 1 ml de soluție tampon de sortare celulară MaxSortin® pentru a resuspenda celulele, apoi adăugați proba în coloana de separare. După ce aceasta curge natural, adăugați soluția tampon de sortare celulară MaxSortin® în două porții, câte 1 ml de fiecare dată. Colectați efluentul într-un tub de centrifugă de 15 ml.
    6. După ce tot tamponul de sortare celulară MaxSortin® s-a scurs, scoateți coloana de separare din sortatorul MACS și plasați-o într-un alt tub de centrifugă nou de 15 ml. Adăugați 3 ml de tampon de sortare celulară MaxSortin® în coloana de separare și utilizați pistonul care vine cu coloana de separare pentru a împinge lichidul direct afară.
    7. Introduceți tubul de centrifugă de 15 ml care conține lichidul colectat într-o centrifugă orizontală și centrifugați la 1500 rpm timp de 5 minute.
    8. După centrifugare, se toarnă supernatantul, se ia 1 mL de soluție salină tamponată cu fosfat Dulbecco (DPBS) 1× pentru a resuspenda celulele, se numără celulele și se efectuează detectarea prin citometrie în flux.

     

    Precauții

    La incubarea bilelor magnetice cu celule, este necesar să le amestecați bine pentru a îmbunătăți eficiența sortării.