MaxSortin® CD4 جلا کولو کټ

د MaxSortin® CD4 جلا کولو کټ د انسان CD4+ T حجرو د ترتیب کولو لپاره کارول کیدی شي. د حجرو سره د نانوسکل CD4 جلا کولو مقناطیسي موتیو د انکیوبیټ کولو له لارې، د CD4+ T حجرو ترتیب کول ترلاسه کیدی شي. د نانوسکل CD4 جلا کولو مقناطیسي موتیو د پردیي وینې مونو نیوکلیئر حجرو (PBMCs) سره انکیوبیټ کیږي او بیا مقناطیسي جلا کولو تابع کیږي، کوم چې د CD4+ T حجرو جلا کول او بډایه کول فعالوي، د CD4+ T حجرو په پاکولو کې رول لوبوي او د حجرو درملنې محصولاتو تولید لپاره پلي کیږي.

۱. د انسان PBMCs په PBS بفر کې چې ۱٪ انساني سیرم البومین (HSA) لري بیا تعلیق کړئ. د شمېرنې لپاره یوه نمونه واخلئ او ۱×۱۰⁷ حجرات په ۱.۵ ملی لیتر EP ټیوب کې انتقال کړئ. بیا د ۵ دقیقو لپاره په ۱۵۰۰ rpm کې سنټرفیوج کړئ.
۲. سپرنټینټ له منځه یوسئ، د حجرو د بیا ځړولو لپاره ۸۰ μL MaxSortin® Cell Sorting Buffer واخلئ، ۲۰ μL CD4 جلا کوونکي مقناطیسي مڼې اضافه کړئ، ښه مخلوط کړئ او بیا یې په یخچال کې د ۲ - ۸ درجو سانتی ګراد په تودوخه کې د ۱۵ دقیقو لپاره د انکیوبیشن لپاره وساتئ.
۳. د MaxSortin® L-Separation ستون واخلئ او د مقناطیسي فعال شوي حجرو ترتیب کولو (MACS) ترتیب کونکي باندې یې ځای په ځای کړئ، او د MaxSortin® حجرو ترتیب کولو بفر سره یې دوه ځله ومینځئ.
۴. هغه نمونه چې د ۲ - ۸ درجو سانتي ګراد په تودوخه کې یې د یخچال څخه بهر وباسئ، ۱ ملی لیتر MACS محلول اضافه کړئ، د ۵ دقیقو لپاره په ۱۵۰۰ rpm کې سنټرفیوج کړئ، او سوپرنټینټ پریږدئ.
۵. د حجرو د بیا ځړولو لپاره ۱ ملی لیتر میکسورټین® سیل سورټینګ بفر اضافه کړئ، نمونه د جلا کولو ستون ته اضافه کړئ. وروسته له دې چې دا په طبیعي ډول بهر شي، میکسورټین® سیل سورټینګ بفر په دوه برخو کې اضافه کړئ، هر ځل ۱ ملی لیتر. فاضله مواد په ۱۵ ملی لیتر سینټرفیوج ټیوب کې راټول کړئ.
۶. وروسته له دې چې ټول MaxSortin® Cell Sorting Buffer بهر شي، د جلا کولو ستون د MACS Sorter څخه لرې کړئ او په بل نوي ۱۵ ملی لیتر سنټرفیوج ټیوب کې یې ځای په ځای کړئ. د MaxSortin® Cell Sorting Buffer ۳ ملی لیتر د جلا کولو ستون ته اضافه کړئ او هغه پسټون وکاروئ چې د جلا کولو ستون سره راځي ترڅو مایع مستقیم بهر ته وباسي.
۷. د ۱۵ ملی لیتر سنټرفیوج ټیوب چې راټول شوي مایع پکې وي په افقي سنټرفیوج کې ځای په ځای کړئ او سنټرفیوج په ۱۵۰۰ rpm کې د ۵ دقیقو لپاره واچوئ.
۸. د سنټرفیوګیشن وروسته، سوپرناټینټ واچوئ، د حجرو د بیا تعلیق کولو، حجرو شمیرلو او د جریان سایټومیټري کشف کولو لپاره د ۱× ډولبیکو فاسفیټ بفر شوي مالګې (DPBS) محلول ۱ ملی لیتر واخلئ.