Rekombinowane ludzkie białko TPO
Trombopoetyna (Tpo), znany również jako czynnik wzrostu i rozwoju megakariocytów (MGDF), jest cytokiną regulującą produkcję megakariocytów i generację płytek krwi. TPO działa wcześnie w linii megakariocytów, promując proliferację komórek progenitorowych megakariocytów i zwiększając ploidalność megakariocytów. Jednak TPO nie wpływa na uwalnianie płytek krwi z dojrzałych megakariocytów [1].
TPO odgrywa kluczową rolę w hematopoezieKomórka macierzysta(HSC) regulacja (Rysunek 1). Badania ujawniają, że sygnalizacja TPO w HSC utrzymuje uśpienie komórek macierzystych, aby zachować ich długowieczność lub napędza ekspansję HSC podczas krytycznych zdarzeń (np. po przeszczepie). W obu scenariuszach TPO moduluje przejścia cyklu komórkowego. Szlak sygnalizacji TPO-Mpl wpływa na metabolizm mitochondriów, a ta regulacja metaboliczna może wpływać na różnicowanie linii HSC. Ponadto sygnalizacja TPO stymuluje samoodnawianie HSC, podkreślając jego potencjał terapeutyczny w leczeniu zaburzeń hematopoetycznych charakteryzujących się upośledzoną funkcją komórek macierzystych, takich jak niedokrwistość aplastyczna, poprzez rozwój leków naśladujących TPO.
W hodowli HSC ex vivo TPO zwiększa ekspansję komórek. Podczas gdy sam TPO minimalnie wpływa na proliferację w systemach hodowli pojedynczych komórek, jego połączenie z SCF, IL-3 i IL-6 znacząco zwiększa wzrost klonalny HSC (Tabela 1). Ostatnie postępy dodatkowo zoptymalizowały formulacje koktajli cytokinowych zawierające TPO w celu poprawy wyników hodowli HSC [4,5].
Tabela 1. Wpływ TPO na tworzenie kolonii komórek macierzystych krwi (HSC) in vitro [3].
Cechy produktu
-
Wysoka czystość
-
Wyjątkowa bioaktywność
-
Niski poziom endotoksyny
-
Sterylne, wolne od mykoplazmy
Walidacja wydajności produktu
Rysunek 2. Analiza SDS-PAGE w warunkach redukujących potwierdza czystość na poziomie >90%.
Rycina 3. Badanie proliferacji komórek Mo7e: produkt T&L wykazuje >5x większą aktywność w porównaniu do importowanych produktów konkurencyjnych.
Informacje o produkcie
Synonimy: trombopoetyna, ligand C-mpl, czynnik stymulujący kolonie megakariocytów (MKCSF), MGDF, THCYT1, MPLLG
Numer rejestracyjny: P40225
Sekwencja aminokwasów: S22-L195 (P157N i R164N) Znacznik: Znacznik His na końcu C
System ekspresji: komórki HEK293Masa cząsteczkowa: 19,5 kDa
Czystość: > 90%, co określono metodą SDS-PAGE
Endotoksyna: Aktywność: Mierzona w teście proliferacji komórek przy użyciu ludzkich megakariocytów białaczkowych MO7e, odpowiadająca aktywności właściwej ≥ 5,0×106 IU/mg.
Formuła: Liofilizowana ze sterylnego PBS (pH 7,4), zwykle uzupełniona 6% - 8% mannitolu jako substancją ochronną.
Stabilność i przechowywanie
Proszek liofilizowany: Zachowuje stabilność do 6 miesięcy przy przechowywaniu w temperaturze -20°C w sterylnych warunkach po rekonstytucji lub 12 miesięcy w temperaturze -80°C.
Rekonstytucja: Rozpuścić w sterylnej wodzie do wstrzykiwań, soli fizjologicznej lub PBS. Utrzymywać rozcieńczone stężenie ≥ 100 µg/ml.
Postępowanie: Podzielić na alikwoty, aby uniknąć powtarzających się cykli zamrażania i rozmrażania.
Przeznaczony dla nas
Wyłącznie do celów badawczych i produkcyjnych.
Odniesienia
[1] de Graaf CA, Metcalf D. Trombopoetyna i komórki macierzyste układu krwiotwórczego. Cykl komórkowy. 2011;10(10):1582-9. doi:10.4161/cc.10.10.15619.
[2] Nakamura-Ishizu A, Suda T. Wieloaspektowa rola trombopoetyny w regulacji komórek macierzystych układu krwiotwórczego. Ann NY Acad Sci. 2020;1466(1):51-58. doi:10.1111/nyas.14169.
[3] Sitnicka E i in. Wpływ trombopoetyny na komórki macierzyste układu krwiotwórczego u myszy. Krew. 1996;87:4998-5005. PMID:8652812.
[4] Pineault N i in. Wpływ cytokin na ekspansję CD34+ we krwi pępowinowej. Cytoterapia. 2010;12:467-80.
[5] Ohmizono Y i in. TPO działa synergicznie z ligandem SCF/flt3 podczas ekspansji komórek macierzystych krwi pępowinowej. Białaczka. 1997;11:524-30. doi:10.1038/sj.leu.2400588.