Leave Your Message

Zestaw izolacyjny MaxSortin® CD8

Stan magazynowy: W magazynie
Model: TL-624KIT

    Kompozycja

     

    Nazwa Numer artykułu Specyfikacja Warunki przechowywania Okres przydatności do spożycia
    MaxSortin® CD8 Separacyjne kulki magnetyczne TL-624 2 ml na 1×10⁹ całkowitej liczby komórek 2 - 8 °C 6 miesięcy
    Bufor sortujący komórki MaxSortin® MS-BF100 100 ml 2 - 8 °C 12 miesięcy
    Kolumna separacyjna MaxSortin® L MS-CL01 1 sztuka 10 - 35 °C 12 miesięcy

     

    Szczegóły produktu

     

    Gatunki reaktywne:Człowiek

    Endotoksyna z kulek magnetycznych:

    Wygląd kulek magnetycznych:Brązowa ciecz

     

    Przeznaczenie

     

    Zestaw MaxSortin® CD8 Separation Kit może być używany do sortowania ludzkich komórek CD8+ T. Poprzez inkubację nanometrycznych kulek magnetycznych do separacji CD8 z komórkami można osiągnąć sortowanie komórek CD8+ T. Nanometryczne kulki magnetyczne do separacji CD8 są inkubowane z mononuklearnymi komórkami krwi obwodowej (PBMC), a następnie poddawane separacji magnetycznej, która umożliwia separację i wzbogacenie komórek CD8+ T, odgrywając rolę w oczyszczaniu komórek CD8+ T i jest stosowana w produkcji produktów terapii komórkowej.

     

    Instrukcja użytkowania

     

    Procedury eksperymentalne

    1. Resuspend ludzkie PBMC w buforze PBS zawierającym 1% ludzkiej albuminy surowicy (HSA). Pobierz próbkę do liczenia i przenieś 1×10⁷ komórek do probówki EP o pojemności 1,5 ml. Następnie wiruj przy 1500 obr./min przez 5 minut.
    2. Odrzuć supernatant, pobierz 80 μl buforu do sortowania komórek MaxSortin® w celu resuscytacji komórek, dodaj 20 μl magnetycznych kulek separujących CD8, dobrze wymieszaj, a następnie umieść w lodówce w temperaturze 2–8 °C na 15 minut w celu inkubacji.
    3. Umieść kolumnę MaxSortin® L-Separation w sorterze MACS (magnetycznie aktywowanym) i przepłucz ją dwukrotnie 1 ml buforu do sortowania komórek MaxSortin®.
    4. Wyjmij próbkę, której inkubacja zakończyła się, z lodówki w temperaturze 2–8°C, dodaj 1 ml buforu do sortowania komórek MaxSortin®, odwiruj przy 1500 obr./min przez 5 minut i usuń supernatant.
    5. Dodaj 1 ml buforu MaxSortin® Cell Sorting Buffer, aby ponownie zawiesić komórki, dodaj próbkę do kolumny separacyjnej. Po jej naturalnym wypłynięciu dodaj bufor MaxSortin® Cell Sorting Buffer w dwóch porcjach, po 1 ml za każdym razem. Zbierz ścieki w probówce wirówkowej o pojemności 15 ml.
    6. Po wypłynięciu całego buforu MaxSortin® Cell Sorting Buffer wyjmij kolumnę separacyjną z sortera MACS i umieść ją w innej nowej probówce wirówkowej o pojemności 15 ml. Dodaj 3 ml buforu MaxSortin® Cell Sorting Buffer do kolumny separacyjnej i użyj tłoka dołączonego do kolumny separacyjnej, aby wypchnąć ciecz bezpośrednio.
    7. Umieścić probówkę wirówkową o pojemności 15 ml zawierającą zebrany płyn w wirówce poziomej i wirować przy 1500 obr./min przez 5 minut.
    8. Po odwirowaniu zlej supernatant, pobierz 1 ml 1-krotnego roztworu buforowanego fosforanem Dulbecco (DPBS) w celu resuscytacji komórek, policz komórki i przeprowadź wykrywanie metodą cytometrii przepływowej.

     

    Środki ostrożności

    1. Podczas inkubacji kulek magnetycznych z komórkami konieczne jest ich dokładne wymieszanie w celu zwiększenia wydajności sortowania.

    2. Bufor i kolumna separacyjna zawarte w tym zestawie mogą być użyte do początkowego eksperymentu. Jeśli wymagane są dodatkowe operacje eksperymentalne, należy zakupić oddzielnie bufor sortujący MaxSortin® Cell Sorting Buffer (numer artykułu: MS-BF100) i kolumnę separacyjną MaxSortin® L (numer artykułu: MS-CL01).

     

    Ważna uwaga

    Produkt ten nadaje się wyłącznie do stosowania w hodowli komórkowej in vitro i nie może być bezpośrednio stosowany w leczeniu klinicznym.