Zestaw do izolacji MaxSortin® CD3

Stan magazynowy: W magazynie
Modele: TL-622KIT

Skontaktuj się z nami

Szczegóły produktu

Kompozycja

Nazwa	Numer artykułu	Specyfikacja	Warunki przechowywania	Okres przydatności do spożycia
MaxSortin® CD3 Separujące kulki magnetyczne	TL-622	2 ml na 1×10⁹ całkowitej liczby komórek	2 - 8 °C	7 miesięcy
Bufor sortujący komórki MaxSortin®	MS-BF100	100 ml	2 - 8 °C	12 miesięcy
Kolumna separacyjna MaxSortin® L	MS-CL01	1 sztuka	10 - 35 °C	12 miesięcy

Szczegóły produktu

Gatunki reaktywne:Człowiek

Endotoksyna z kulek magnetycznych:

Wygląd kulek magnetycznych:Brązowa ciecz

Przeznaczenie

Zestaw MaxSortin® CD3 Separation Kit można stosować do sortowania ludzkich komórek CD3+ T. Poprzez inkubację nanometrycznych kulek magnetycznych do separacji CD3 z komórkami można uzyskać sortowanie komórek CD3+.

Instrukcja użytkowania

Procedury eksperymentalne

1. Zawieś ponownie ludzkie mononuklearne komórki krwi obwodowej (PBMC) w buforze PBS zawierającym 1% ludzkiej albuminy surowicy (HSA). Pobierz próbkę do zliczenia i przenieś 1×10⁷ komórek do probówki EP o pojemności 1,5 ml. Następnie odwiruj przy 1500 obr./min przez 5 minut.
2. Odmierz 80 μl buforu do sortowania komórek MaxSortin®, aby zawiesić komórki, dodaj 20 μl magnetycznych kulek separujących CD3, dobrze wymieszaj, a następnie umieść w lodówce w temperaturze 2–8 °C i inkubuj przez 15 minut.
3. Umieść kolumnę MaxSortin® L-Separation w sorterze MACS (magnetycznie aktywowanym) i przepłucz ją dwukrotnie 1 ml buforu do sortowania komórek MaxSortin®.
4. Wyjmij próbkę, której inkubacja zakończyła się, z lodówki w temperaturze 2–8°C, dodaj 1 ml buforu do sortowania komórek MaxSortin®, odwiruj przy 1500 obr./min przez 5 minut i usuń supernatant.
5. Dodaj 1 ml buforu MaxSortin® Cell Sorting Buffer, aby ponownie zawiesić komórki, dodaj próbkę do kolumny separacyjnej. Po jej naturalnym wypłynięciu dodaj bufor MaxSortin® Cell Sorting Buffer w dwóch porcjach, po 1 ml za każdym razem. Zbierz ścieki w probówce wirówkowej o pojemności 15 ml.
6. Po wypłynięciu całego buforu MaxSortin® Cell Sorting Buffer wyjmij kolumnę separacyjną z sortera MACS i umieść ją w innej nowej probówce wirówkowej o pojemności 15 ml. Dodaj 3 ml buforu MaxSortin® Cell Sorting Buffer do kolumny separacyjnej i użyj tłoka dołączonego do kolumny separacyjnej, aby wypchnąć ciecz bezpośrednio.
7. Umieścić probówkę wirówkową o pojemności 15 ml zawierającą zebrany płyn w wirówce poziomej i wirować przy 1500 obr./min przez 5 minut.
8. Po odwirowaniu zlej supernatant, pobierz 1 ml 1-krotnego roztworu buforowanego fosforanem Dulbecco (DPBS) w celu resuscytacji komórek, policz komórki i przeprowadź wykrywanie metodą cytometrii przepływowej.

Środki ostrożności

1. Podczas inkubacji kulek magnetycznych z komórkami konieczne jest ich dokładne wymieszanie w celu zwiększenia wydajności sortowania.

2. Podczas stosowania tego produktu w celu usuwania i sortowania komórek CD3+ konieczne jest odpowiednie zwiększenie ilości użytych kulek magnetycznych.

3. Bufor i kolumna separacyjna zawarte w tym zestawie mogą być użyte do początkowego eksperymentu. Jeśli wymagane są dodatkowe operacje eksperymentalne, należy zakupić oddzielnie bufor sortujący MaxSortin® Cell Sorting Buffer (numer artykułu: MS-BF100) i kolumnę separacyjną MaxSortin® L (numer artykułu: MS-CL01).