Leave Your Message

Odczynnik do aktywacji komórek T ActCel

Stan magazynowy: W magazynie
Modele: TL-6001-1000

    Szczegóły produktu


    Gatunki reaktywne:Człowiek

    Endotoksyna:

    Wygląd:Brązowa ciecz


    Przeznaczenie


    Odczynnik ActCel T Cell Activation Reagent syntetyzuje się poprzez sprzężenie nanomacierzy z przeciwciałem anty-ludzkim CD3 i przeciwciałem anty-ludzkim CD28. Może on delikatnie i skutecznie aktywować limfocyty T lub PBMC (jednojądrowe komórki krwi obwodowej).

    Instrukcja użytkowania


    Procedury eksperymentalne:
    1.1 Przeprowadzić eksperyment przy mianie 1:200. Konkretne ilości dodatków podano w poniższej tabeli:

    Płytka kulturowa Maksymalna objętość kultury Całkowita liczba komórek T Objętość odczynnika aktywującego komórki T dodana do każdego dołka
    96-dołkowy 0,2 ml 0,3×10⁶ 1 μl
    48-dołkowy 1 ml 1×10⁶ 5 μl
    24-dołkowy 2 ml 2×10⁶ 10 μl
    12-dołkowy 4 ml 4×10⁶ 20 μl
    6-dołkowy 5 ml 5×10⁶ 25 μl

    1.2 Biorąc za przykład 1×10⁶ komórek T: Dodaj 995 μl podłoża X-VIVOTM 15 i 5 μl odczynnika aktywującego komórki T (zawierającego 200 IU/ml IL-2) do 1×10⁶ komórek T. Następnie hoduj je w temperaturze 37 °C i 5% CO₂ przez 2 dni.
    1.3 Po hodowli przez 2-3 dni odwirować przy 300 g przez 10 minut, usunąć supernatant i dodać 2 ml świeżego, kompletnego medium, aby usunąć odczynnik aktywacji komórek T. Następnie kontynuować hodowlę w temperaturze 37 °C w atmosferze 5% CO₂.
    1.4 Co 2 dni dokładnie pipetuj zawiesinę komórek, aby równomiernie wymieszać, dodaj 2-krotność objętości świeżego kompletnego medium (stosunek objętości oryginalnej do objętości uzupełniającej wynosi 1:2) i policz komórki, aby obliczyć współczynnik amplifikacji. Następnie hoduj je w inkubatorze w temperaturze 37 °C, 5% CO₂. Na przykład, jeśli medium zostanie uzupełnione 4 dnia, a objętość oryginalna wynosi 2 ml, należy dodać 4 ml medium, a całkowita objętość końcowa wyniesie 6 ml.

    Środki ostrożności


    1. Podczas inkubacji odczynnika aktywującego limfocyty T z komórkami, konieczne jest ich dokładne wymieszanie w celu zwiększenia skuteczności aktywacji.
    2. Miano odczynnika aktywującego limfocyty T można regulować w zakresie 1:100 - 300.
    3. Czas wirowania mający na celu usunięcie odczynnika aktywującego limfocyty T można zoptymalizować zgodnie z wymaganiami klienta.

    Dodatkowe środki ostrożności


    Produkt ten nadaje się wyłącznie do stosowania w hodowli komórkowej in vitro i nie może być bezpośrednio stosowany w leczeniu klinicznym.