AMMS®NK ସେଲ୍ କଲଚର୍ କିଟ୍ 3.0

ପ୍ରାକୃତିକ କିଲର (NK) କୋଷ ଚିକିତ୍ସା ଇମ୍ୟୁନୋଥେରାପିରେ ଏକ ପ୍ରମୁଖ ଗବେଷଣା କେନ୍ଦ୍ର ପାଲଟିଛି, ଯାହା ଅଙ୍କୋଲୋଜିରେ ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ସମ୍ଭାବନା ପ୍ରଦର୍ଶନ କରୁଛି। NK କୋଷଗୁଡ଼ିକ ହେଉଛି ବ୍ରଡ-ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରମ୍ ସାଇଟୋଟକ୍ସିକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ସହିତ ଜନ୍ମଗତ ଲିମ୍ଫୋସାଇଟ, ଟ୍ୟୁମର କୋଷ, ଭାଇରସ୍-ସଂକ୍ରମିତ କୋଷ ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ରୋଗନିରୋଧୀ ସତ୍ତାଗୁଡ଼ିକୁ ଟାର୍ଗେଟ କରିବାକୁ ସକ୍ଷମ। ପାରମ୍ପରିକ T କୋଷ ଚିକିତ୍ସାଠାରୁ ଭିନ୍ନ, NK କୋଷଗୁଡ଼ିକ ପୂର୍ବ ଆଣ୍ଟିଜେନ ପ୍ରାଇମିଂ ବିନା ତୁରନ୍ତ ସାଇଟୋଟକ୍ସିକ ପ୍ରଭାବ ପ୍ରୟୋଗ କରେ, ଯାହା ଟ୍ୟୁମର ଆଣ୍ଟିଜେନ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତାଠାରୁ ସ୍ୱାଧୀନ ଭାବରେ ଦ୍ରୁତ ଚିକିତ୍ସାମୂଳକ କାର୍ଯ୍ୟକୁ ସକ୍ଷମ କରିଥାଏ।

ଚିତ୍ର ୧. NK କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଆଣ୍ଟି-ଟ୍ୟୁମର ଯନ୍ତ୍ରପାତି
(ପ୍ରତିଛବି ଉତ୍ସ: ଆକ୍ଟା ଫାର୍ମାସ୍ୟୁଟିକା ସିନିକା)

NK କୋଷଗୁଡ଼ିକ ବିଭିନ୍ନ ଉତ୍ସରୁ ଉତ୍ସ ହୋଇପାରିବ, ଯେପରିକି ପେରିଫେରାଲ୍ ରକ୍ତ, ନାଭିକଳା ରକ୍ତ (UCB), ପ୍ରେରିତ ପ୍ଲୁରିପୋଟେଣ୍ଟ ଷ୍ଟେମ୍ କୋଷ (iPSCs), ଏବଂ NK92 କୋଷ ରେଖା। ଅଧ୍ୟୟନଗୁଡ଼ିକ ଉଲ୍ଲେଖ କରନ୍ତି ଯେ UCB-ପ୍ରାପ୍ତ NK କୋଷ ଏବଂ ପୂର୍ବପୁରୁଷ ଉପଲବ୍ଧ ଉତ୍ସଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟରେ ସର୍ବାଧିକ ପ୍ରଚୁରତା ପ୍ରଦର୍ଶନ କରନ୍ତି। UCB-ପ୍ରାପ୍ତ NK କୋଷଗୁଡ଼ିକର ସରଳ ଫେନୋଟାଇପ୍ ଗ୍ରାଫ୍ଟ-ବନାମ୍ସ-ହୋଷ୍ଟ ଡିଜିଜ୍ (GVHD) ବିପଦକୁ ହ୍ରାସ କରେ, ଯେତେବେଳେ ସେମାନଙ୍କର ବ୍ୟାପକ ଉପଲବ୍ଧତା ଏବଂ ଉତ୍କୃଷ୍ଟ ପ୍ରସାର କ୍ଷମତା UCB କୁ NK କୋଷ ଉତ୍ପାଦନ ପାଇଁ ଏକ ରଣନୈତିକ ଉତ୍ସ ଭାବରେ ସ୍ଥାନିତ କରେ। ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ଯେ, ପ୍ରଥମ CAR-NK କ୍ଲିନିକାଲ୍ ପରୀକ୍ଷଣ UCB-ପ୍ରାପ୍ତ NK କୋଷଗୁଡ଼ିକୁ ନିଯୁକ୍ତ କରିଥିଲା। ଇମ୍ୟୁନୋଥେରାପି ଗବେଷଣାରେ UCB-NK କୋଷଗୁଡ଼ିକର ବର୍ଦ୍ଧିତ ପ୍ରମୁଖତା ସ୍କେଲେବଲ୍, ଉଚ୍ଚ-ଶୁଦ୍ଧତା NK କୋଷ ପ୍ରସାରଣ ହାସଲ କରିବାର ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଚ୍ୟାଲେଞ୍ଜକୁ ଅଙ୍କିତ କରେ।ଇନ୍ କ୍ରୋକ୍ଲିନିକାଲ୍ ଅନୁବାଦ ପାଇଁ।

AMMS®NK ସେଲ୍ କଲଚର୍ କିଟ୍ 3.0 କୁ ଏଥିପାଇଁ ଡିଜାଇନ୍ କରାଯାଇଛି ପୂର୍ବତନ ଦୃଶ୍ୟସତେଜ କିମ୍ବା କ୍ରାଇଓପ୍ରିଜର୍ଭ ନାଭିକଳା ରକ୍ତ ମନୋନ୍ୟୁକ୍ଲିୟର କୋଷ (CBMCs) ରୁ ଉଚ୍ଚ-ଶୁଦ୍ଧତା NK କୋଷଗୁଡ଼ିକର ସକ୍ରିୟକରଣ ଏବଂ ପ୍ରସାରଣ। ଏକ 2-ଲିଟର କଲଚର ସିଷ୍ଟମ 90% ରୁ ଅଧିକ NK ଶୁଦ୍ଧତା ସହିତ 4-6 ବିଲିୟନ କୋଷର ଉତ୍ପାଦନ ହାସଲ କରେ।

​ପ୍ରମୁଖ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟଗୁଡିକ​​

• ​ରାସାୟନିକ ଭାବରେ ପରିଭାଷିତ ସଂସ୍କୃତି​
  ​​
• ନମୁନା ସୁସଙ୍ଗତତା: ସତେଜ କିମ୍ବା କ୍ରାଇଓପ୍ରିଜର୍ଭଡ୍ UCB CBMCs​​
  ​
• ଜେନୋ-ମୁକ୍ତ ଫର୍ମୁଲେସନ୍‌​
  ​
• ଉଚ୍ଚ-ଉପଜ୍ୱଳନ ସମ୍ପ୍ରସାରଣ: ପ୍ରତି 2L ସିଷ୍ଟମରେ 4-6 ବିଲିୟନ କୋଷ ଏବଂ 90%ରୁ ଅଧିକ NK ଶୁଦ୍ଧତା।

କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା ତଥ୍ୟ​

​
ଚିତ୍ର ୧. AMMS®NK ସେଲ୍ କଲଚର୍ କିଟ୍ 3.0 ସହିତ ସଂସ୍କୃତ UCB-ପ୍ରାପ୍ତ NK କୋଷଗୁଡ଼ିକର ମୋଟ କୋଷ ବିସ୍ତାର ଏବଂ କାର୍ଯ୍ୟକ୍ଷମତା।

​
ଚିତ୍ର୨। AMMS®NK ସେଲ୍ କଲଚର୍ କିଟ୍ 3.0 ସହିତ ସଂସ୍କୃତ UCB-ପ୍ରାପ୍ତ NK କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ CD3-CD56+ କୋଷ ଜନସଂଖ୍ୟା ପ୍ରତିଶତ।

ସତର୍କତା
1,ନମୁନା ଆବଶ୍ୟକତା:
① ଯଦି ନାଭିକଳା ରକ୍ତର ରକ୍ତ ପରିମାଣ (ଆଣ୍ଟିକୁଆଗୁଲଣ୍ଟ ସମେତ) 80mL ରୁ କମ୍ ହୁଏ କିମ୍ବା ଆଶାକରାଯାଇଥିବା NK ଅମଳ ଅଧିକ ହୁଏ, ତେବେ ଅଟୋଲୋଗସ୍ ପ୍ଲାଜ୍ମା ବଦଳରେ HPL ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ସୁପାରିଶ କରାଯାଏ। HPL ର କୋଷ ପ୍ରସାର ହାର ଅଟୋଲୋଗସ୍ ପ୍ଲାଜ୍ମା ଅପେକ୍ଷା ପ୍ରାୟ 1-2 ଗୁଣ ଅଧିକ।
② ରକ୍ତ ସଂଗ୍ରହ ପରେ 12 ଘଣ୍ଟା ମଧ୍ୟରେ ଅପରେସନ୍ ସମାପ୍ତ ହେବା ଉଚିତ।
③ ସୁପାରିଶ କରାଯାଇଛି ଯେ ଫ୍ରିଜଡ୍ ନମୁନାର ଫ୍ରିଜଡ୍ ଘନତା 2-4 x 10 7/mL ହେବା ଉଚିତ୍, ଏବଂ ପୁନରୁଦ୍ଧାର ପରେ କାର୍ଯ୍ୟକ୍ଷମତା ହାର 80% ରୁ କମ୍ ହେବା ଉଚିତ୍ ନୁହେଁ। ନାଭିକଳା ରକ୍ତ ନମୁନା ଚାଷ ସମୟରେ ଅଟୋଲୋଗସ୍ ପ୍ଲାଜ୍ମା ପରିବର୍ତ୍ତେ HPL ବ୍ୟବହାର କରାଯିବା ଉଚିତ। ପେରିଫେରାଲ୍ ରକ୍ତ ନମୁନା (ହେପାରିନ ସୋଡିୟମ୍ ଆଣ୍ଟିକୋଆଗୁଲେଣ୍ଟ) ପାଇଁ ଅଟୋଲୋଗସ୍ ପ୍ଲାଜ୍ମା ବ୍ୟବହାର କରାଯିବା ଉଚିତ୍, ଏବଂ ଅଟୋଲୋଗସ୍ ପ୍ଲାଜ୍ମା ପରିବର୍ତ୍ତେ HPL ମଧ୍ୟ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ।2、ଭେସେଲ୍ ଘନତା: ବୋତଲର ପ୍ରାରମ୍ଭିକ କୋଷ ଘନତା 1x10 6 କୋଷ/mL ହେବା ଉଚିତ୍। ଯେତେବେଳେ ଅଧିକ ଲୋହିତ ରକ୍ତ କୋଷ ଥାଏ, ସେତେବେଳେ କୋଷର ବୋତଲ ଘନତାକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରିବା ଏଡାଇବା ପାଇଁ ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ଗଣନା କିମ୍ବା ଲୋହିତ ରକ୍ତ କୋଷ ଲିସିସ୍ ଗଣନା ଚୟନ କରାଯିବା ଉଚିତ।
3、ତରଳ ଘନତା: ତରଳ ପ୍ରତିସ୍ଥାପନ ପରେ ଘନତା 1x10 6/mL ରୁ କମ୍ ହେବା ଉଚିତ୍ ନୁହେଁ।
୪, ସଂସ୍କୃତି ମାଧ୍ୟମର ବ୍ୟବହାର:
① ପ୍ରତ୍ୟେକ ଇନଫ୍ୟୁଜନ ପୂର୍ବରୁ କଲ୍ଚର ମାଧ୍ୟମକୁ ପ୍ରାକୃତିକ ଭାବରେ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ପୁନଃଉଷ୍ମ କରାଯିବା ଉଚିତ।
② ପୁନଃତାପମାତ୍ରା ପାଇଁ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ କଲଚର ମାଧ୍ୟମ ବୋତଲକୁ ୩୭℃ ଇନକ୍ୟୁବେଟରରେ ରଖନ୍ତୁ ନାହିଁ, ନଚେତ୍ ଏହା ପରିପୂରକ କଲଚର ମାଧ୍ୟମରେ ସାଇଟୋକାଇନ୍ସର ନିଷ୍କ୍ରିୟତାକୁ ତ୍ୱରାନ୍ୱିତ କରିବ।
GMP ଗ୍ରେଡ୍ CGT ରିଏଜେଣ୍ଟ
③ ପ୍ରସ୍ତୁତ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ମାଧ୍ୟମର ସେଲଫ ଲାଇଫ୍ କମ୍, ଏବଂ ଏହାକୁ ପ୍ରାୟ ଗୋଟିଏ ସପ୍ତାହ ମଧ୍ୟରେ ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ସୁପାରିଶ କରାଯାଇଛି।
5, ପ୍ଲାଜମାର ସଠିକ୍ ପରିଚାଳନା ଏବଂ ସଂରକ୍ଷଣ: ବିବରଣୀ ପାଇଁ ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀ ଦେଖନ୍ତୁ। କେନ୍ଦ୍ରୀଭୂତ ପ୍ଲାଜମା ସ୍ୱଚ୍ଛ ହେବା ଉଚିତ।
୬,କଲ୍ଚର ବ୍ୟାଗର ବ୍ୟବହାର: ଯେତେବେଳେ କଲ୍ଚର ପରିମାଣ ୧ ଲିଟରରୁ କମ୍ ଥାଏ, ସେତେବେଳେ କଲ୍ଚର ବ୍ୟାଗଗୁଡ଼ିକୁ ରଖିବା ପୂର୍ବରୁ ଫୋଲ୍ଡ କରିବାକୁ ପଡିବ। ଆମ କମ୍ପାନୀର ସୁପାରିଶ କରାଯାଇଥିବା ମଡେଲ ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ସୁପାରିଶ କରାଯାଇଛି।
7, ଇନକ୍ୟୁବେସନ୍ ସମୟ: A, ଏକ ସମତଳ ଶଯ୍ୟାରେ ରାତାରାତି 4 ℃ ପାଇଁ ଇନକ୍ୟୁବେଟ୍ କରାଯିବା ଉଚିତ। (ଜରୁରୀକାଳୀନ ପରିସ୍ଥିତିରେ, 2 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ 37 ℃ ରେ ଇନକ୍ୟୁବେଟ୍ କରିବାକୁ ଚେଷ୍ଟା କରନ୍ତୁ)
8, କଲଚରର ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ କଲଚର ବୋତଲକୁ ଇଚ୍ଛାନୁସାରେ ହଲାନ୍ତୁ ନାହିଁ: ନଚେତ୍, ସକ୍ରିୟ କ୍ଲୋନ୍ ଗୋଷ୍ଠୀ ଉପରକୁ ଭାସିବା ସହଜ, ଏବଂ ଆବରଣ କାରକ କୋଷ ଗୋଷ୍ଠୀର ସକ୍ରିୟକରଣକୁ ହ୍ରାସ କରିବ।
୯,କାରକ ବ୍ୟବହାର: କାନ୍ଥରେ ଝୁଲୁଥିବାକାରକ କ୍ଷତିକୁ କମ କରିବା ପାଇଁ, ବ୍ୟବହାର ପୂର୍ବରୁ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫ୍ୟୁଗେସନ୍ କରିବାକୁ ସୁପାରିଶ କରାଯାଏ। କାରକ ଧାରଣ କରିଥିବା ଭାଏଲକୁ ଏକ 50mL ସେଣ୍ଟ୍ରିଫ୍ୟୁଜ୍ ଟ୍ୟୁବ୍ ଏବଂ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫ୍ୟୁଜ୍ ରେ 1000rpm ରେ 1-2 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ରଖନ୍ତୁ।
୧୦, ଉପକରଣ ରକ୍ଷଣାବେକ୍ଷଣ: ନିୟମିତ ଭାବରେ CO2 ଇନକ୍ୟୁବେଟରର ତାପମାତ୍ରା ଏବଂ ସାନ୍ଦ୍ରତା ଯାଞ୍ଚ କରନ୍ତୁ, ଏବଂ ସମୟ ମଧ୍ୟରେ ଫିଲ୍ଟର ବଦଳାନ୍ତୁ। ଜୈବିକ ସୁରକ୍ଷା କ୍ୟାବିନେଟର ନିୟମିତ ରକ୍ଷଣାବେକ୍ଷଣ ଏବଂ ସଫା କରନ୍ତୁ।
୧୧, ପରିବେଶଗତ ତଦାରଖ: ସ୍ୱଚ୍ଛ କ୍ଷେତ୍ରର ପରିବେଶଗତ ମାନଦଣ୍ଡ ସୁନିଶ୍ଚିତ କରିବା ପାଇଁ ନିୟମିତ ଭାବରେ ପ୍ରାଥମିକ, ମଧ୍ୟମ ଏବଂ ଉଚ୍ଚ ଦକ୍ଷତା ଫିଲ୍ଟରଗୁଡ଼ିକୁ ବଦଳାନ୍ତୁ।
୧୨, ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଉପଭୋଗ୍ୟ ସାମଗ୍ରୀର ସ୍ଥିର ପ୍ରକାର ଏବଂ ମଡେଲ: ଚାଷ ପ୍ରଭାବ ଉପରେ ପରିବର୍ତ୍ତନଶୀଳ ମଡେଲ ଏବଂ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣର ପ୍ରଭାବ ପୂର୍ବରୁ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯିବା ଉଚିତ, ଯେପରିକି ୭୫ ସେମି ୨ କଲଚର ବୋତଲ ଏବଂ କୋଷ କଲଚର ବ୍ୟାଗ।