ପ୍ରତିକ୍ରିୟାଶୀଳ ପ୍ରଜାତି: ମାନବ
ଏଣ୍ଡୋଟକ୍ସିନ୍:
ଦୃଶ୍ୟମାନତା: ବାଦାମୀ ତରଳ ପଦାର୍ଥ
ଆକ୍ଟସେଲ୍ ଟି ସେଲ୍ ଆକ୍ଟିଭେସନ୍ ରିଏଜେଣ୍ଟ୍କୁ ଏକ ନାନୋମାଟ୍ରିକ୍ସ ସହିତ ଆଣ୍ଟି-ହ୍ୟୁମାନ୍ CD3 ଆଣ୍ଟିବଡି ଏବଂ ଆଣ୍ଟି-ହ୍ୟୁମାନ୍ CD28 ଆଣ୍ଟିବଡି ଯୋଡ଼ି ସଂଶ୍ଳେଷିତ କରାଯାଏ, ଏବଂ ଏହା ଟି ସେଲ୍ କିମ୍ବା PBMCs (ପେରିଫେରାଲ୍ ବ୍ଲଡ୍ ମୋନୋନ୍ୟୁକ୍ଲିୟର ସେଲ୍ସ)କୁ ଧୀରେ ଏବଂ ଦକ୍ଷତାର ସହିତ ସକ୍ରିୟ କରିପାରିବ।
ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ପ୍ରକ୍ରିୟାଗୁଡ଼ିକ:
୧.୧ ପରୀକ୍ଷଣଟି ୧:୨୦୦ ଟାଇଟରରେ କରନ୍ତୁ। ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଯୋଗ ପରିମାଣ ନିମ୍ନଲିଖିତ ସାରଣୀରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି:
| ସଂସ୍କୃତି ପ୍ଲେଟ୍ | ସର୍ବାଧିକ ସଂସ୍କୃତି ପରିମାଣ | ମୋଟ ଟି ସେଲ୍ ସଂଖ୍ୟା | ପ୍ରତି କୂପରେ ଟି ସେଲ୍ ଆକ୍ଟିଭେସନ୍ ରିଏଜେଣ୍ଟର ପରିମାଣ ଯୋଡାଗଲା |
| ୯୬-କୂପ | ୦.୨ ମିଲି | ୦.୩×୧୦⁶ | ୧ μଲିଟର |
| ୪୮-କୂପ | ୧ ମିଲି | ୧×୧୦⁶ | ୫ μଲିଟର |
| ୨୪-କୂପ | ୨ ମିଲି | ୨×୧୦⁶ | ୧୦ μଲିଟର |
| ୧୨-କୂପ | ୪ ମିଲି | ୪×୧୦⁶ | ୨୦ μଲିଟର |
| ୬-କୂପ | ୫ ମିଲି | ୫×୧୦⁶ | ୨୫ μଲିଟର |
୧.୨ ଉଦାହରଣ ଭାବରେ ୧×୧୦⁶ ଟି କୋଷକୁ ନିଅନ୍ତୁ: ୧×୧୦⁶ ଟି କୋଷରେ ୯୯୫ μL X-VIVOTM ୧୫ ମଧ୍ୟମ ଏବଂ ୫ μL ଟି କୋଷ ସକ୍ରିୟକରଣ ରିଏଜେଣ୍ଟ (୨୦୦ IU/mL IL-୨ ଧାରଣ କରି) ଯୋଡନ୍ତୁ। ତା’ପରେ ସେଗୁଡ଼ିକୁ ୩୭ °C ରେ ୫% CO₂ ତଳେ ୨ ଦିନ ପାଇଁ କଲଚର କରନ୍ତୁ।
୧.୩ ୨ - ୩ ଦିନ ପାଇଁ କଲଚରିଂ ପରେ, ୧୦ ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ୩୦୦ ଗ୍ରାମ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫ୍ୟୁଜ୍ କରନ୍ତୁ, ସୁପରନାଟାଣ୍ଟ ବାହାର କରନ୍ତୁ, ଏବଂ ଟି କୋଷ ସକ୍ରିୟକରଣ ରିଏଜେଣ୍ଟ ବାହାର କରିବା ପାଇଁ ୨ ମି.ଲି. ତାପରେ ୫% CO₂ ତଳେ ୩୭ ଡିଗ୍ରୀ ସେଲ୍ସିୟସ୍ ରେ କଲଚରିଂ ଜାରି ରଖନ୍ତୁ।
୧.୪ ପ୍ରତି ୨ ଦିନରେ ଥରେ, କୋଷ ସସପେନସନକୁ ସମାନ ଭାବରେ ମିଶ୍ରଣ କରିବା ପାଇଁ ପିପେଟ୍ କରନ୍ତୁ, ତାଜା ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ମାଧ୍ୟମର ୨ ଗୁଣ (ପ୍ରାଥମିକ ଆୟତନ ସହିତ ପରିପୂରକ ଆୟତନର ଅନୁପାତ ୧:୨) ଯୋଡନ୍ତୁ, ଏବଂ ଆମ୍ପ୍ଲିଫିକେସନ୍ ଫ୍ୟାକ୍ଟର ଗଣନା କରିବା ପାଇଁ କୋଷଗୁଡ଼ିକୁ ଗଣନା କରନ୍ତୁ। ତାପରେ ସେଗୁଡ଼ିକୁ ୩୭°C, ୫% CO₂ ଇନକ୍ୟୁବେଟରରେ କଲଚର କରନ୍ତୁ। ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ଯଦି ମଧ୍ୟମଟି ଚତୁର୍ଥ ଦିନରେ ପରିପୂରକ ହୁଏ, ଏବଂ ମୂଳ ଆୟତନ ୨ ମିଲି, ତେବେ ୪ ମିଲି ମଧ୍ୟମ ଯୋଡନ୍ତୁ, ଏବଂ ଶେଷ ମୋଟ ଆୟତନ ୬ ମିଲି ହେବ।
- ଟି କୋଷ ସକ୍ରିୟକରଣ ପୁନଃଜୀବଜକୁ କୋଷଗୁଡ଼ିକ ସହିତ ଇନକ୍ୟୁବେଟ୍ କରିବା ସମୟରେ, ସକ୍ରିୟକରଣ ଦକ୍ଷତା ଉନ୍ନତ କରିବା ପାଇଁ ସେମାନଙ୍କୁ ଭଲ ଭାବରେ ମିଶ୍ରଣ କରିବା ଆବଶ୍ୟକ।
- ଟି କୋଷ ସକ୍ରିୟକରଣ ରିଏଜେଣ୍ଟର ଟାଇଟରକୁ 1:100 - 300 ମଧ୍ୟରେ ଆଡଜଷ୍ଟ କରାଯାଇପାରିବ।
- ଗ୍ରାହକଙ୍କ ଆବଶ୍ୟକତା ଅନୁସାରେ ଟି କୋଷ ସକ୍ରିୟକରଣ ରିଏଜେଣ୍ଟକୁ ବାହାର କରିବା ପାଇଁ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫ୍ୟୁଗିଂର ସମୟକୁ ଅନୁକୂଳିତ କରାଯାଇପାରିବ।
ଏହି ଉତ୍ପାଦ କେବଳ ଇନ ଭିଟ୍ରୋ କୋଷ ସଂସ୍କୃତି ପାଇଁ ପ୍ରଯୁଜ୍ୟ ଏବଂ ଏହାକୁ ସିଧାସଳଖ କ୍ଲିନିକାଲ୍ ଚିକିତ୍ସା ପାଇଁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ ନାହିଁ।