| Navn | Artikkelnummer | Spesifikasjon | Oppbevaringsforhold | Holdbarhet |
| MaxSortin® CD4-separasjonsmagnetiske kuler | TL-623 | 2 ml for 1×10⁹ totalt antall celler | 2–8 °C | 6 måneder |
| MaxSortin® cellesorteringsbuffer | MS-BF100 | 100 ml | 2–8 °C | 12 måneder |
| MaxSortin® L-separasjonskolonne | MS-CL01 | 1 stk | 10–35 °C | 12 måneder |
Reaktive arterMenneske
Magnetisk perle endotoksin
Utseende på magnetiske perlerBrun væske
MaxSortin® CD4-separasjonssettet kan brukes til å sortere humane CD4+ T-celler. Ved å inkubere nanoskala CD4-separasjonsmagnetiske kuler med celler, kan sortering av CD4+ T-celler oppnås. De nanoskala CD4-separasjonsmagnetiske kulene inkuberes med perifere blodmononukleære celler (PBMC-er) og deretter utsettes for magnetisk separasjon, noe som muliggjør separasjon og anriking av CD4+ T-celler, og spiller en rolle i rensing av CD4+ T-celler og kan brukes til produksjon av celleterapiprodukter.
1. Resuspender humane PBMC-er i PBS-buffer som inneholder 1 % humant serumalbumin (HSA). Ta en prøve for telling og overfør 1 × 10⁷ celler til et 1,5 ml EP-rør. Sentrifuger deretter ved 1500 o/min i 5 minutter.
2. Kast supernatanten, ta 80 μL MaxSortin® Cell Sorting Buffer for å resuspendere cellene, tilsett 20 μL CD4-separasjonsmagnetiske kuler, bland godt og plasser dem deretter i kjøleskap ved 2–8 °C for inkubasjon i 15 minutter.
3. Ta MaxSortin® L-separasjonskolonnen og plasser den på den magnetisk aktiverte cellesorteringsenheten (MACS), og skyll den to ganger med 1 ml MaxSortin® cellesorteringsbuffer.
4. Ta prøven som har fullført inkubasjonen ut av kjøleskapet ved 2–8 °C, tilsett 1 ml MACS-løsning, sentrifuger ved 1500 o/min i 5 minutter, og kast supernatanten.
5. Tilsett 1 ml MaxSortin® Cell Sorting Buffer for å resuspendere cellene, og tilsett prøven i separasjonskolonnen. Etter at den har flytet ut naturlig, tilsett MaxSortin® Cell Sorting Buffer i to porsjoner, 1 ml hver gang. Samle opp avløpsvannet i et 15 ml sentrifugerør.
6. Etter at all MaxSortin® Cell Sorting Buffer har tømt seg, fjern separasjonskolonnen fra MACS-sortereren og plasser den i et nytt 15 ml sentrifugerør. Tilsett 3 ml MaxSortin® Cell Sorting Buffer i separasjonskolonnen og bruk stempelet som følger med separasjonskolonnen til å presse væsken direkte ut.
7. Plasser 15 ml sentrifugerøret som inneholder den oppsamlede væsken i en horisontal sentrifuge og sentrifuger ved 1500 o/min i 5 minutter.
8. Etter sentrifugering, hell ut supernatanten, ta 1 ml av 1× Dulbeccos fosfatbufrede saltvannsløsning (DPBS) for å resuspendere cellene, tell cellene og utfør flowcytometri-deteksjon.
Når man ruger de magnetiske kulene med celler, er det nødvendig å blande dem grundig for å forbedre sorteringseffektiviteten.
