| Isem | Numru tal-Artiklu | Speċifikazzjoni | Kundizzjonijiet tal-Ħażna | Ħajja fuq l-ixkaffa |
| Żibeġ Manjetiċi tas-Separazzjoni MaxSortin® CD4 | TL-623 | 2 mL għal 1×10⁹ ċelluli totali | 2 - 8 °C | 6 xhur |
| Buffer tal-Issortjar taċ-Ċelloli MaxSortin® | MS-BF100 | 100 mL | 2 - 8 °C | 12-il xahar |
| Kolonna ta' Separazzjoni MaxSortin® L | MS-CL01 | biċċa waħda | 10 - 35 °C | 12-il xahar |
Speċi ReattiviBniedem
Endotossina taż-Żibeġ Manjetiċi
Dehra tax-Xibka ManjetikaLikwidu kannella
Il-MaxSortin® CD4 Separation Kit jista' jintuża biex jissepara ċ-ċelloli T CD4+ umani. Permezz tal-inkubazzjoni ta' żibeġ manjetiċi ta' separazzjoni CD4 fuq skala nanometrika maċ-ċelloli, tista' tinkiseb l-issortjar taċ-ċelloli T CD4+. Iż-żibeġ manjetiċi ta' separazzjoni CD4 fuq skala nanometrika jiġu inkubati ma' ċelloli mononukleari tad-demm periferali (PBMCs) u mbagħad jiġu soġġetti għal separazzjoni manjetika, li tippermetti s-separazzjoni u l-arrikkiment taċ-ċelloli T CD4+, li għandha rwol fil-purifikazzjoni taċ-ċelloli T CD4+ u hija applikabbli għall-produzzjoni ta' prodotti ta' terapija taċ-ċelloli.
1. Erġa' ssospendi l-PBMCs umani f'buffer PBS li fih 1% albumina tas-serum uman (HSA). Ħu kampjun għall-għadd u ittrasferixxi 1×10⁷ ċelluli f'tubu EP ta' 1.5 mL. Imbagħad iċċentrifuga b'1500 rpm għal 5 minuti.
2. Armi s-supernatant, ħu 80 μL ta' MaxSortin® Cell Sorting Buffer biex terġa' tissospendi ċ-ċelloli, żid 20 μL ta' żibeġ manjetiċi għas-separazzjoni tas-CD4, ħawwad sew u mbagħad poġġihom fil-friġġ f'temperatura ta' 2 - 8 °C għal inkubazzjoni għal 15-il minuta.
3. Ħu l-MaxSortin® L-Separation Column u poġġiha fuq is-sorter tal-issortjar taċ-ċelloli attivat bil-manjetiku (MACS), u laħlaħha darbtejn b'1 mL ta' MaxSortin® Cell Sorting Buffer.
4. Oħroġ il-kampjun li jkun lesta l-inkubazzjoni mill-friġġ f'temperatura ta' 2 - 8 °C, żid 1 mL ta' soluzzjoni MACS, iċċentrifuga b'1500 rpm għal 5 minuti, u armi s-supernatant.
5. Żid 1 mL ta' MaxSortin® Cell Sorting Buffer biex terġa' tissospendi ċ-ċelloli, żid il-kampjun fil-kolonna tas-separazzjoni. Wara li joħroġ b'mod naturali, żid MaxSortin® Cell Sorting Buffer f'żewġ porzjonijiet, 1 mL kull darba. Iġbor l-effluwent f'tubu taċ-ċentrifuga ta' 15 mL.
6. Wara li l-MaxSortin® Cell Sorting Buffer ikun ħareġ kollu, neħħi l-kolonna tas-separazzjoni mis-sorter MACS u poġġiha f'tubu ċentrifugu ieħor ġdid ta' 15 mL. Żid 3 mL ta' MaxSortin® Cell Sorting Buffer fil-kolonna tas-separazzjoni u uża l-pistun li jiġi mal-kolonna tas-separazzjoni biex timbotta l-likwidu 'l barra direttament.
7. Poġġi t-tubu taċ-ċentrifuga ta' 15 mL li fih il-likwidu miġbur f'ċentrifuga orizzontali u ċċentrifuga b'1500 rpm għal 5 minuti.
8. Wara ċ-ċentrifugazzjoni, ferra s-supernatant, ħu 1 mL ta' soluzzjoni ta' 1× Dulbecco's phosphate-buffered saline (DPBS) biex tissospendi mill-ġdid iċ-ċelloli, għodd iċ-ċelloli u wettaq skoperta permezz ta' ċitometrija tal-fluss.
Meta tkun qed tinkuba ż-żibeġ manjetiċi maċ-ċelloli, huwa meħtieġ li tħallathom sewwa biex titjieb l-effiċjenza tal-issortjar.
