Kit Pengasingan CD4 MaxSortin®

Kit Pemisahan CD4 MaxSortin® boleh digunakan untuk mengisih sel T CD4+ manusia. Melalui pengeraman manik magnet pemisahan CD4 skala nano dengan sel, pengisihan sel T CD4+ boleh dicapai. Manik magnet pemisahan CD4 skala nano diinkubasi dengan sel mononuklear darah periferi (PBMC) dan kemudian tertakluk kepada pemisahan magnetik, yang membolehkan pemisahan dan pengayaan sel T CD4+, memainkan peranan dalam menulenkan sel T CD4+ dan boleh digunakan untuk penghasilan produk terapi sel.

1. Menggantung semula PBMC manusia dalam penimbal PBS yang mengandungi 1% albumin serum manusia (HSA). Ambil sampel untuk mengira dan pindahkan 1×10⁷ sel ke dalam tiub EP 1.5 mL. Kemudian sentrifuge pada 1500 rpm selama 5 minit.
2. Buang supernatan, ambil 80 μL Penampan Pengisihan Sel MaxSortin® untuk menggantung semula sel, tambah 20 μL manik magnet pemisah CD4, gaul rata dan kemudian letakkannya di dalam peti sejuk pada suhu 2 - 8 °C untuk pengeraman selama 15 minit.
3. Ambil Lajur Pemisahan L MaxSortin® dan letakkan pada penyisihan sel teraktif-magnet (MACS), dan bilas dua kali dengan 1 mL Penimbal Isih Sel MaxSortin®.
4. Ambil sampel yang telah selesai pengeraman keluar dari peti sejuk pada 2 - 8 °C, tambah 1 mL larutan MACS, sentrifuge pada 1500 rpm selama 5 minit, dan buang supernatan.
5. Tambah 1 mL Penimbal Isih Sel MaxSortin® untuk menggantung semula sel, tambah sampel ke dalam lajur pengasingan. Selepas ia mengalir keluar secara semula jadi, tambah Penimbal Pengisihan Sel MaxSortin® dalam dua bahagian, 1 mL setiap kali. Kumpulkan efluen dalam tiub emparan 15 mL.
6. Selepas semua Penimbal Pengisihan Sel MaxSortin® telah mengalir keluar, keluarkan lajur pemisah daripada penyusun MACS dan letakkannya dalam satu lagi tiub emparan 15 mL baharu. Tambah 3 mL Penimbal Isih Sel MaxSortin® ke dalam lajur pemisah dan gunakan omboh yang disertakan bersama lajur pemisah untuk menolak cecair keluar terus.
7. Letakkan tiub emparan 15 mL yang mengandungi cecair terkumpul ke dalam emparan mendatar dan emparan pada 1500 rpm selama 5 minit.
8. Selepas sentrifugasi, tuangkan supernatan, ambil 1 mL larutan garam penimbal fosfat (DPBS) 1× Dulbecco untuk menggantung semula sel, mengira sel dan menjalankan pengesanan sitometri aliran.