| പേര് | ലേഖന നമ്പർ | സ്പെസിഫിക്കേഷൻ | സംഭരണ \u200b\u200bവ്യവസ്ഥകൾ | ഷെൽഫ് ലൈഫ് |
| മാക്സ്സോർട്ടിൻ® സിഡി4 സെപ്പറേഷൻ മാഗ്നറ്റിക് ബീഡുകൾ | ടിഎൽ-623 | 1×10⁹ ആകെ സെല്ലുകൾക്ക് 2 മില്ലി | 2 - 8 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസ് | 6 മാസം |
| മാക്സ്സോർട്ടിൻ® സെൽ സോർട്ടിംഗ് ബഫർ | എംഎസ്-ബിഎഫ്100 | 100 മില്ലി | 2 - 8 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസ് | 12 മാസം |
| മാക്സ്സോർട്ടിൻ® എൽ-സെപ്പറേഷൻ കോളം | എംഎസ്-സിഎൽ01 | 1 കഷണം | 10 - 35 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസ് | 12 മാസം |
പ്രതിപ്രവർത്തന ജീവിവർഗ്ഗങ്ങൾ: മനുഷ്യൻ
മാഗ്നറ്റിക് ബീഡ് എൻഡോടോക്സിൻ:
കാന്തിക കൊന്തയുടെ രൂപം: തവിട്ട് നിറത്തിലുള്ള ദ്രാവകം
മനുഷ്യ CD4+ T കോശങ്ങളെ തരംതിരിക്കുന്നതിന് MaxSortin® CD4 സെപ്പറേഷൻ കിറ്റ് ഉപയോഗിക്കാം. നാനോസ്കെയിൽ CD4 സെപ്പറേഷൻ മാഗ്നറ്റിക് ബീഡുകളെ കോശങ്ങളുമായി ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുന്നതിലൂടെ, CD4+ T കോശങ്ങളുടെ തരംതിരിക്കൽ കൈവരിക്കാൻ കഴിയും. നാനോസ്കെയിൽ CD4 സെപ്പറേഷൻ മാഗ്നറ്റിക് ബീഡുകൾ പെരിഫറൽ ബ്ലഡ് മോണോ ന്യൂക്ലിയർ സെല്ലുകൾ (PBMCs) ഉപയോഗിച്ച് ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുകയും തുടർന്ന് കാന്തിക വേർതിരിക്കലിന് വിധേയമാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു, ഇത് CD4+ T കോശങ്ങളെ വേർതിരിക്കാനും സമ്പുഷ്ടമാക്കാനും പ്രാപ്തമാക്കുന്നു, CD4+ T കോശങ്ങളെ ശുദ്ധീകരിക്കുന്നതിൽ ഒരു പങ്കു വഹിക്കുന്നു, കൂടാതെ സെൽ തെറാപ്പി ഉൽപ്പന്നങ്ങളുടെ ഉത്പാദനത്തിന് ഇത് ബാധകമാണ്.
1. 1% ഹ്യൂമൻ സെറം ആൽബുമിൻ (HSA) അടങ്ങിയ PBS ബഫറിൽ മനുഷ്യ PBMC-കൾ വീണ്ടും സസ്പെൻഡ് ചെയ്യുക. എണ്ണുന്നതിനായി ഒരു സാമ്പിൾ എടുത്ത് 1×10⁷ കോശങ്ങൾ 1.5 mL EP ട്യൂബിലേക്ക് മാറ്റുക. തുടർന്ന് 1500 rpm-ൽ 5 മിനിറ്റ് സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്യുക.
2. സൂപ്പർനേറ്റന്റ് ഉപേക്ഷിച്ച്, 80 μL മാക്സ്സോർട്ടിൻ® സെൽ സോർട്ടിംഗ് ബഫർ എടുത്ത് കോശങ്ങൾ വീണ്ടും സസ്പെൻഡ് ചെയ്യുക, 20 μL CD4 സെപ്പറേഷൻ മാഗ്നറ്റിക് ബീഡുകൾ ചേർക്കുക, നന്നായി ഇളക്കുക, തുടർന്ന് 2 - 8 °C താപനിലയിൽ 15 മിനിറ്റ് ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുന്നതിനായി റഫ്രിജറേറ്ററിൽ വയ്ക്കുക.
3. മാക്സ്സോർട്ടിൻ® എൽ-സെപ്പറേഷൻ കോളം എടുത്ത് മാഗ്നറ്റിക്-ആക്ടിവേറ്റഡ് സെൽ സോർട്ടിംഗ് (MACS) സോർട്ടറിൽ വയ്ക്കുക, തുടർന്ന് 1 മില്ലി മാക്സ്സോർട്ടിൻ® സെൽ സോർട്ടിംഗ് ബഫർ ഉപയോഗിച്ച് രണ്ടുതവണ കഴുകുക.
4. ഇൻകുബേഷൻ പൂർത്തിയാക്കിയ സാമ്പിൾ 2 - 8°C യിൽ റഫ്രിജറേറ്ററിൽ നിന്ന് പുറത്തെടുക്കുക, 1 mL MACS ലായനി ചേർക്കുക, 1500 rpm ൽ 5 മിനിറ്റ് സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്യുക, തുടർന്ന് സൂപ്പർനേറ്റന്റ് ഉപേക്ഷിക്കുക.
5. സെല്ലുകൾ വീണ്ടും സസ്പെൻഡ് ചെയ്യുന്നതിന് 1 മില്ലി മാക്സ്സോർട്ടിൻ® സെൽ സോർട്ടിംഗ് ബഫർ ചേർക്കുക, സാമ്പിൾ വേർതിരിക്കൽ നിരയിലേക്ക് ചേർക്കുക. അത് സ്വാഭാവികമായി പുറത്തേക്ക് ഒഴുകിയ ശേഷം, രണ്ട് ഭാഗങ്ങളായി മാക്സ്സോർട്ടിൻ® സെൽ സോർട്ടിംഗ് ബഫർ ചേർക്കുക, ഓരോ തവണയും 1 മില്ലി. 15 മില്ലി സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബിൽ മലിനജലം ശേഖരിക്കുക.
6. മാക്സ്സോർട്ടിൻ® സെൽ സോർട്ടിംഗ് ബഫർ മുഴുവൻ പുറത്തേക്ക് ഒഴുകിയ ശേഷം, MACS സോർട്ടറിൽ നിന്ന് സെപ്പറേഷൻ കോളം നീക്കം ചെയ്ത് മറ്റൊരു പുതിയ 15 mL സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബിൽ വയ്ക്കുക. സെപ്പറേഷൻ കോളത്തിലേക്ക് 3 mL മാക്സ്സോർട്ടിൻ® സെൽ സോർട്ടിംഗ് ബഫർ ചേർക്കുക, സെപ്പറേഷൻ കോളത്തിനൊപ്പം വരുന്ന പിസ്റ്റൺ ഉപയോഗിച്ച് ദ്രാവകം നേരിട്ട് പുറത്തേക്ക് തള്ളുക.
7. ശേഖരിച്ച ദ്രാവകം അടങ്ങിയ 15 mL സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബ് ഒരു തിരശ്ചീന സെൻട്രിഫ്യൂജിലും സെൻട്രിഫ്യൂജിലും 1500 rpm-ൽ 5 മിനിറ്റ് വയ്ക്കുക.
8. സെൻട്രിഫ്യൂഗേഷന് ശേഷം, സൂപ്പർനേറ്റന്റ് ഒഴിക്കുക, 1 മില്ലി 1× ഡൽബെക്കോസ് ഫോസ്ഫേറ്റ്-ബഫേർഡ് സലൈൻ (DPBS) ലായനി എടുത്ത് കോശങ്ങൾ വീണ്ടും സസ്പെൻഡ് ചെയ്യുക, കോശങ്ങൾ എണ്ണുക, ഫ്ലോ സൈറ്റോമെട്രി ഡിറ്റക്ഷൻ നടത്തുക.
കാന്തിക ബീഡുകളെ കോശങ്ങളുമായി ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുമ്പോൾ, തരംതിരിക്കൽ കാര്യക്ഷമത മെച്ചപ്പെടുത്തുന്നതിന് അവയെ നന്നായി കലർത്തേണ്ടത് ആവശ്യമാണ്.
