Instrumentum Culturae Cellularum AMMS®NK 3.0

Therapia cellularum Natural Killer (NK) facta est focus investigationis maximi momenti in immunotherapia, potentiam insignem in oncologia demonstrans. Cellulae NK sunt lymphocyti innati cum activitate cytotoxica latae spectri, capaces ad cellulas tumorales, cellulas virus infectas, et alias entitates pathologicas petendas. Distinctae a therapiis conventionalibus cellularum T, cellulae NK effectus cytotoxicos immediatos exercent sine praevia praeparatione antigeni, permittentes actionem therapeuticam rapidam independentem a specificitate antigeni tumoralis.

Figura 1. Mechanismi antitumorales cellularum NK
(Fontes imaginis: Acta Pharmaceutica Sinica)

Cellulae NK ex variis originibus derivari possunt, inter quas sanguis periphericus, sanguis funiculi umbilicalis (UCB), cellulae pluripotentes inductae (iPSCs), et stirps cellularum NK92. Studia ostendunt cellulas NK et progenitores ex UCB derivatas abundantiam maximam inter fontes praesto exhibere. Phenotypus simplex cellularum NK ex UCB derivatarum pericula Morbi Insitionis contra Hospitem (GVHD) minuit, dum lata earum disponibilitas et capacitas proliferativa superior UCB ut fontem strategicum ad productionem cellularum NK collocant. Praesertim, primum experimentum clinicum CAR-NK cellulas NK ex UCB derivatas adhibuit. Crescens prominentia cellularum UCB-NK in investigatione immunotherapiae provocationem criticam expansionis cellularum NK scalabilis et altae puritatis assequendae illustrat.in vitroad translationem clinicam.

Instrumentum culturae cellularum AMMS®NK 3.0 destinatum est ad... ex vivoActivatio et expansio cellularum NK altae puritatis ex cellulis mononuclearibus sanguinis funiculi umbilicalis (CBMCs) recentibus vel cryopreservatis. Systema culturae 2 litrorum proventus 4-6 miliardorum cellularum assequitur, puritate NK excedente 90%.

​Proprietates Claves​

• ​Cultura chemice definita​
  ​​
• Compatibilitas exemplorum: CBMCs UCB recentia vel cryopreservata.​
  ​
• Formula sine xeno​
  ​
• Expansio magnae copiae: 4-6 miliarda cellularum per systema 2L cum puritate NK >90%.

Data Efficaciae

​
Figura 1. Expansio totalis cellularum et viabilitas cellularum NK ex UCB derivatarum, cultarum cum AMMS®NK Cell Culture Kit 3.0.

​
Figura II. Percentatio populationis cellularum CD3-CD56+ in cellulis NK ex UCB derivatis, cultae cum AMMS®NK Cell Culture Kit 3.0.

Cautiones
1. Requisita exemplaris:
1. Si volumen sanguinis funiculi umbilicalis (anticoagulante incluso) minus quam 80mL est aut messis NK exspectata maior est, commendatur ut HPL loco plasmatis autologi adhibeatur. Celeritas proliferationis cellularum HPL fere 1-2 vicibus maior est quam plasmatis autologi.
② Operatio intra duodecim horas post sanguinis collectionem perfici debet.
③ Commendatur ut densitas congelationis exemplorum congelatorum sit 2-4 x 10⁶/mL, et ratio viabilitatis post recuperationem non minor quam 80% sit. HPL loco plasmatis autologi in cultura exemplorum sanguinis funiculi umbilicalis adhibeatur. Plasma autologum pro exemplis sanguinis peripherici adhibendum est (heparinum natricum anticoagulans), et HPL etiam loco plasmatis autologi adhiberi potest. 2. Densitas vasorum: densitas cellularum initialis lagenae commendatur ut sit 1 x 10⁶ cellulae/mL. Cum plures cellulae sanguinis rubrae sunt, numeratio fluorescentiae vel numeratio lysis cellularum sanguinis rubrae eligenda est ne densitatem cellulae in lagena afficiat.
3. Densitas fluidi: densitas post permutationem fluidi non debet esse inferior quam 1x10⁶/mL.
4. Usus medii culturae:
① Medium culturae ante singulas infusiones naturaliter ad temperaturam ambientem denuo calefaciendum est.
2. Noli totam lagenam medii culturae in incubatorem 37℃ ad retemperandum ponere, alioquin inactivationem cytokinorum in medio culturae supplementato accelerabit.
Reagens CGT Gradus GMP
③ Medium completum paratum breve tempus servandi habet, et commendatur ut intra unam circiter hebdomadam consumatur.
5. Recta tractatio et conservatio plasmatis: vide instructiones pro singulis. Plasma centrifugatum debet esse perspicuum.
6. Usus saccorum culturae: Cum volumen culturae minus quam 1L est, sacculi culturae plicandi sunt antequam ponantur. Suadetur ut exemplar a societate nostra commendatum adhibeatur.
7. Tempus incubationis: A, factor in lecto plano per noctem 4°C incubandus est. (Si casus necessitatis accidit, per duas horas ad 37°C incubare conare.)
8. Noli lagenam culturae pro arbitrio agitare in initio culturae: alioquin, grex clonorum activatus facile sursum attolletur, et factor obducendi activationem gregis cellularum minuet.
9. Usus factorum: Ut iactura factorum pendentium in pariete minuatur, centrifugationem ante usum perficere commendatur. Fialam factores continentem in tubum centrifugatorium 50 ml pone et centrifuga ad 1000 rpm per 1-2 minuta.
10. Cura instrumentorum: temperaturam et concentrationem incubatoris CO2 regulariter inspice, et filtrum tempestive muta. Cura et purgatio armarii securitatis biologicae regulariter peragendae sunt.
11. Monitorium environmentalem: filtra primaria, media et alta efficientia regulariter muta ut normae environmentales regionum mundarum serventur.
12. Genera et exempla fixa rerum experimentalium consumendarum: effectus exemplorum et specificationum mutantium in effectus culturae antea aestimandus est, ut ampullae culturae 75cm2 et sacculi culturae cellularum.