MaxSortin® CD4 분리 키트

MaxSortin® CD4 분리 키트는 인간 CD4+ T 세포를 분리하는 데 사용할 수 있습니다. 나노 크기의 CD4 분리 자성 비드를 세포와 배양하여 CD4+ T 세포를 분리할 수 있습니다. 나노 크기의 CD4 분리 자성 비드를 말초혈액 단핵세포(PBMC)와 배양한 후 자성 분리를 통해 CD4+ T 세포를 분리하고 농축하여 CD4+ T 세포를 정제하는 데 중요한 역할을 하며, 세포 치료제 생산에도 활용 가능합니다.

1. 1% 인간 혈청 알부민(HSA)이 포함된 PBS 완충액에 인간 PBMC를 재현탁합니다. 계수를 위해 샘플을 채취하여 1×10⁷개의 세포를 1.5 mL EP 튜브에 옮깁니다. 그런 다음 1500 rpm에서 5분간 원심분리합니다.
2. 상층액을 버리고, 80 μL의 MaxSortin® 세포 분류 완충액을 넣어 세포를 재부유시키고, 20 μL의 CD4 분리 자기 비드를 첨가하여 잘 섞은 후, 2~8 °C의 냉장고에 넣어 15분간 배양합니다.
3. MaxSortin® L-분리 컬럼을 꺼내 자기 활성화 세포 분류(MACS) 분류기에 놓고, 1mL의 MaxSortin® 세포 분류 완충액으로 두 번 헹굽니다.
4. 2~8°C의 냉장고에서 배양이 완료된 샘플을 꺼내고 MACS 용액 1mL을 첨가한 후 1500rpm에서 5분간 원심분리하고 상층액을 버립니다.
5. MaxSortin® 세포 분리 완충액 1mL를 첨가하여 세포를 재현탁시키고, 시료를 분리 컬럼에 넣습니다. 시료가 자연적으로 흘러나오면 MaxSortin® 세포 분리 완충액을 1mL씩 두 번에 나누어 첨가합니다. 15mL 원심분리 튜브에 용출액을 모읍니다.
6. MaxSortin® 세포 분류 완충액이 모두 흘러나온 후, MACS 분류기에서 분리 컬럼을 분리하여 다른 15mL 원심분리 튜브에 넣습니다. 분리 컬럼에 MaxSortin® 세포 분류 완충액 3mL를 넣고 분리 컬럼과 함께 제공되는 피스톤을 사용하여 액체를 직접 밀어냅니다.
7. 수집된 액체가 담긴 15mL 원심분리관을 수평 원심분리기에 넣고 1500rpm으로 5분간 원심분리합니다.
8. 원심분리 후 상층액을 버리고 1× Dulbecco 인산완충식염수(DPBS) 용액 1mL을 취해 세포를 재부유시키고, 세포를 계수한 후 유세포분석기로 검출합니다.