| ಹೆಸರು | ಲೇಖನ ಸಂಖ್ಯೆ | ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ | ಶೇಖರಣಾ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು | ಶೆಲ್ಫ್ ಜೀವನ |
| ಮ್ಯಾಕ್ಸ್ಸೋರ್ಟಿನ್® CD4 ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ಮಣಿಗಳು | ಟಿಎಲ್ -623 | 1×10⁹ ಒಟ್ಟು ಕೋಶಗಳಿಗೆ 2 ಮಿ.ಲೀ. | 2 - 8 °C | 6 ತಿಂಗಳುಗಳು |
| ಮ್ಯಾಕ್ಸ್ಸೋರ್ಟಿನ್® ಸೆಲ್ ವಿಂಗಡಣೆ ಬಫರ್ | ಎಂಎಸ್-ಬಿಎಫ್100 | 100 ಮಿ.ಲೀ. | 2 - 8 °C | 12 ತಿಂಗಳುಗಳು |
| ಮ್ಯಾಕ್ಸ್ಸೋರ್ಟಿನ್® ಎಲ್-ಸೆಪರೇಷನ್ ಕಾಲಮ್ | ಎಂಎಸ್-ಸಿಎಲ್ 01 | 1 ತುಂಡು | 10 - 35 °C | 12 ತಿಂಗಳುಗಳು |
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಪ್ರಭೇದಗಳು: ಮಾನವ
ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ಬೀಡ್ ಎಂಡೋಟಾಕ್ಸಿನ್: 2 EU/ಮಿಲಿಲೀ
ಕಾಂತೀಯ ಮಣಿಯ ಗೋಚರತೆ: ಕಂದು ದ್ರವ
ಮ್ಯಾಕ್ಸ್ಸೋರ್ಟಿನ್® CD4 ಸೆಪರೇಷನ್ ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಮಾನವ CD4+ T ಕೋಶಗಳನ್ನು ವಿಂಗಡಿಸಲು ಬಳಸಬಹುದು. ಜೀವಕೋಶಗಳೊಂದಿಗೆ ನ್ಯಾನೊಸ್ಕೇಲ್ CD4 ಸೆಪರೇಷನ್ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ಮಣಿಗಳನ್ನು ಇನ್ಕ್ಯುಬೇಟ್ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ, CD4+ T ಕೋಶಗಳ ವಿಂಗಡಣೆಯನ್ನು ಸಾಧಿಸಬಹುದು. ನ್ಯಾನೊಸ್ಕೇಲ್ CD4 ಸೆಪರೇಷನ್ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ಮಣಿಗಳನ್ನು ಬಾಹ್ಯ ರಕ್ತ ಮಾನೋನ್ಯೂಕ್ಲಿಯರ್ ಕೋಶಗಳೊಂದಿಗೆ (PBMCs) ಇನ್ಕ್ಯುಬೇಟ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ಕಾಂತೀಯ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗೆ ಒಳಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು CD4+ T ಕೋಶಗಳ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಮತ್ತು ಪುಷ್ಟೀಕರಣವನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ, CD4+ T ಕೋಶಗಳನ್ನು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸುವಲ್ಲಿ ಪಾತ್ರವನ್ನು ವಹಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಕೋಶ ಚಿಕಿತ್ಸಾ ಉತ್ಪನ್ನಗಳ ಉತ್ಪಾದನೆಗೆ ಅನ್ವಯಿಸುತ್ತದೆ.
1. 1% ಮಾನವ ಸೀರಮ್ ಅಲ್ಬುಮಿನ್ (HSA) ಹೊಂದಿರುವ PBS ಬಫರ್ನಲ್ಲಿ ಮಾನವ PBMC ಗಳನ್ನು ಮರುಹೊಂದಿಸಿ. ಎಣಿಕೆಗಾಗಿ ಮಾದರಿಯನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಂಡು 1×10⁷ ಕೋಶಗಳನ್ನು 1.5 mL EP ಟ್ಯೂಬ್ಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಿ. ನಂತರ 1500 rpm ನಲ್ಲಿ 5 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಮಾಡಿ.
2. ಸೂಪರ್ನೇಟಂಟ್ ಅನ್ನು ತ್ಯಜಿಸಿ, ಕೋಶಗಳನ್ನು ಮತ್ತೆ ಜೋಡಿಸಲು 80 μL ಮ್ಯಾಕ್ಸ್ಸೋರ್ಟಿನ್® ಸೆಲ್ ಸಾರ್ಟಿಂಗ್ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ, 20 μL CD4 ಬೇರ್ಪಡಿಸುವ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ಮಣಿಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, ಚೆನ್ನಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ನಂತರ ಅವುಗಳನ್ನು 2 - 8 °C ನಲ್ಲಿ ರೆಫ್ರಿಜರೇಟರ್ನಲ್ಲಿ 15 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಇನ್ಕ್ಯುಬೇಟ್ ಮಾಡಲು ಇರಿಸಿ.
3. ಮ್ಯಾಕ್ಸ್ಸೋರ್ಟಿನ್® ಎಲ್-ಸೆಪರೇಷನ್ ಕಾಲಮ್ ತೆಗೆದುಕೊಂಡು ಅದನ್ನು ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್-ಆಕ್ಟಿವೇಟೆಡ್ ಸೆಲ್ ಸಾರ್ಟಿಂಗ್ (MACS) ಸಾರ್ಟರ್ ಮೇಲೆ ಇರಿಸಿ, ಮತ್ತು 1 ಮಿಲಿ ಮ್ಯಾಕ್ಸ್ಸೋರ್ಟಿನ್® ಸೆಲ್ ಸಾರ್ಟಿಂಗ್ ಬಫರ್ನಿಂದ ಎರಡು ಬಾರಿ ತೊಳೆಯಿರಿ.
4. 2 - 8 °C ನಲ್ಲಿ ರೆಫ್ರಿಜರೇಟರ್ನಿಂದ ಕಾವು ಮುಗಿದ ಮಾದರಿಯನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಂಡು, 1 ಮಿಲಿ MACS ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, 1500 rpm ನಲ್ಲಿ 5 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಸೂಪರ್ನೇಟಂಟ್ ಅನ್ನು ತ್ಯಜಿಸಿ.
5. ಕೋಶಗಳನ್ನು ಮತ್ತೆ ಜೋಡಿಸಲು 1 ಮಿಲಿ ಮ್ಯಾಕ್ಸ್ಸೋರ್ಟಿನ್® ಸೆಲ್ ಸಾರ್ಟಿಂಗ್ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, ಮಾದರಿಯನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಕಾಲಮ್ಗೆ ಸೇರಿಸಿ. ಅದು ನೈಸರ್ಗಿಕವಾಗಿ ಹೊರಗೆ ಹರಿಯುವ ನಂತರ, ಎರಡು ಭಾಗಗಳಲ್ಲಿ ಮ್ಯಾಕ್ಸ್ಸೋರ್ಟಿನ್® ಸೆಲ್ ಸಾರ್ಟಿಂಗ್ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, ಪ್ರತಿ ಬಾರಿ 1 ಮಿಲಿ. 15 ಮಿಲಿ ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ ಟ್ಯೂಬ್ನಲ್ಲಿ ತ್ಯಾಜ್ಯವನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ.
6. ಎಲ್ಲಾ MaxSortin® ಸೆಲ್ ಸಾರ್ಟಿಂಗ್ ಬಫರ್ ಹೊರಗೆ ಹರಿಯಿತು ನಂತರ, MACS ಸಾರ್ಟರ್ ನಿಂದ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿ ಮತ್ತು ಅದನ್ನು ಮತ್ತೊಂದು ಹೊಸ 15 mL ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ ಟ್ಯೂಬ್ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಿ. ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಕಾಲಮ್ಗೆ 3 mL ಮ್ಯಾಕ್ಸ್ಸೋರ್ಟಿನ್® ಸೆಲ್ ಸಾರ್ಟಿಂಗ್ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿ ಮತ್ತು ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಕಾಲಮ್ನೊಂದಿಗೆ ಬರುವ ಪಿಸ್ಟನ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ದ್ರವವನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ಹೊರಗೆ ತಳ್ಳಿರಿ.
7. ಸಂಗ್ರಹಿಸಿದ ದ್ರವವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ 15 mL ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ ಟ್ಯೂಬ್ ಅನ್ನು ಸಮತಲ ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ ಮತ್ತು ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ನಲ್ಲಿ 1500 rpm ನಲ್ಲಿ 5 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಇರಿಸಿ.
8. ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ನಂತರ, ಸೂಪರ್ನೇಟಂಟ್ ಅನ್ನು ಸುರಿಯಿರಿ, ಕೋಶಗಳನ್ನು ಮತ್ತೆ ಜೋಡಿಸಲು 1 ಮಿಲಿ 1× ಡಲ್ಬೆಕೊ ಫಾಸ್ಫೇಟ್-ಬಫರ್ಡ್ ಸಲೈನ್ (DPBS) ದ್ರಾವಣವನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ, ಕೋಶಗಳನ್ನು ಎಣಿಸಿ ಮತ್ತು ಹರಿವಿನ ಸೈಟೋಮೆಟ್ರಿ ಪತ್ತೆಯನ್ನು ನಡೆಸಿ.
ಕಾಂತೀಯ ಮಣಿಗಳನ್ನು ಕೋಶಗಳೊಂದಿಗೆ ಕಾವುಕೊಡುವಾಗ, ವಿಂಗಡಣೆಯ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಲು ಅವುಗಳನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡುವುದು ಅವಶ್ಯಕ.
