| Ime | Broj artikla | Specifikacija | Uvjeti skladištenja | Rok trajanja |
| MaxSortin® magnetske kuglice za odvajanje CD4 | TL-623 | 2 mL za 1×10⁹ ukupnih stanica | 2 - 8 °C | 6 mjeseci |
| MaxSortin® pufer za sortiranje stanica | MS-BF100 | 100 ml | 2 - 8 °C | 12 mjeseci |
| MaxSortin® L-kolumna za separaciju | MS-CL01 | 1 komad | 10 - 35 °C | 12 mjeseci |
Reaktivne vrsteČovjek
Endotoksin magnetskih kuglica
Izgled magnetskih kuglicaSmeđa tekućina
MaxSortin® CD4 Separation Kit može se koristiti za sortiranje ljudskih CD4+ T stanica. Inkubacijom nanoskalnih magnetskih kuglica za separaciju CD4 sa stanicama, može se postići sortiranje CD4+ T stanica. Nanoskalne magnetske kuglice za separaciju CD4 inkubiraju se s mononuklearnim stanicama periferne krvi (PBMC), a zatim se podvrgavaju magnetskoj separaciji, što omogućuje separaciju i obogaćivanje CD4+ T stanica, igrajući ulogu u pročišćavanju CD4+ T stanica i primjenjive su za proizvodnju proizvoda za staničnu terapiju.
1. Resuspendirajte ljudske PBMC-e u PBS puferu koji sadrži 1% humanog serumskog albumina (HSA). Uzmite uzorak za brojanje i prenesite 1 × 10⁷ stanica u EP epruvetu od 1,5 mL. Zatim centrifugirajte pri 1500 okretaja u minuti tijekom 5 minuta.
2. Odbacite supernatant, uzmite 80 μL MaxSortin® pufera za sortiranje stanica za resuspendiranje stanica, dodajte 20 μL magnetskih kuglica za odvajanje CD4, dobro promiješajte i zatim ih stavite u hladnjak na 2 - 8 °C radi inkubacije tijekom 15 minuta.
3. Uzmite MaxSortin® L-separacijsku kolonu i stavite je na magnetski aktivirani sorter za stanično sortiranje (MACS) te je dva puta isperite s 1 mL MaxSortin® pufera za sortiranje stanica.
4. Izvadite uzorak koji je završio inkubaciju iz hladnjaka na 2 - 8 °C, dodajte 1 mL MACS otopine, centrifugirajte pri 1500 okretaja u minuti tijekom 5 minuta i bacite supernatant.
5. Dodajte 1 mL MaxSortin® pufera za sortiranje stanica kako biste resuspendirali stanice, a zatim dodajte uzorak u kolonu za separaciju. Nakon što prirodno istječe, dodajte MaxSortin® pufer za sortiranje stanica u dva obroka, po 1 mL svaki put. Skupite efluent u centrifugalnu epruvetu od 15 mL.
6. Nakon što je sav MaxSortin® pufer za sortiranje stanica istekao, izvadite kolonu za separaciju iz MACS sortera i stavite je u drugu novu centrifugalnu epruvetu od 15 mL. Dodajte 3 mL MaxSortin® pufera za sortiranje stanica u kolonu za separaciju i upotrijebite klip koji dolazi s kolonom za separaciju kako biste izravno istisnuli tekućinu.
7. Stavite centrifugalnu epruvetu od 15 mL koja sadrži sakupljenu tekućinu u horizontalnu centrifugu i centrifugirajte pri 1500 okretaja u minuti tijekom 5 minuta.
8. Nakon centrifugiranja, izlijte supernatant, uzmite 1 mL 1× Dulbeccove fosfatno puferirane otopine soli (DPBS) za resuspendiranje stanica, prebrojite stanice i provedite detekciju protočnom citometrijom.
Prilikom inkubacije magnetskih kuglica sa stanicama, potrebno ih je temeljito promiješati kako bi se poboljšala učinkovitost sortiranja.
