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उच्च तापमान वाले वातावरण में मरम्मत चैंपियन! टी एंड एल बायोटेक्नोलॉजी ने आधिकारिक तौर पर नई पीढ़ी के थर्मोस्टेबल बीएफजीएफ प्रोटीन को लॉन्च किया

2025-04-30

 

बेसिक फाइब्रोब्लास्ट ग्रोथ फैक्टर (बीएफजीएफ), फाइब्रोब्लास्ट ग्रोथ फैक्टर परिवार का एक सदस्य, लक्ष्य पर रिसेप्टर्स को बांधकर और सक्रिय करके सिग्नलिंग ट्रांसडक्शन मार्गों को ट्रिगर करता हैटी कोशिका सतहों। bFGF एंडोथेलियल कोशिकाओं, न्यूरॉन्स, चोंड्रोसाइट्स, चिकनी मांसपेशी कोशिकाओं, मेलानोसाइट्स और एडीपोसाइट्स सहित विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं के प्रसार को नियंत्रित करता है। इसके अतिरिक्त, bFGF कोशिका स्व-नवीनीकरण, विभेदन, विकास, ऊतक मरम्मत और पुनर्जनन जैसी जैविक प्रक्रियाओं में शामिल है। कोशिका वृद्धि के लिए एक महत्वपूर्ण कारक के रूप में, bFGF का उपयोग विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं की इन विट्रो संस्कृति में व्यापक रूप से किया जाता है।

अध्ययनों से पता चलता है कि स्तनधारी कोशिका संवर्धन में लगभग 8 घंटे के आधे जीवन के साथ, शारीरिक स्थितियों के तहत bFGF अस्थिर है। कम तापीय स्थिरता और bFGF की छोटी अर्ध-आयु कोशिका संवर्धन में चुनौतियों का कारण बनती है, जिसके लिए लगातार वृद्धि कारक पूरकता या दैनिक माध्यम प्रतिस्थापन की आवश्यकता होती है। प्राकृतिक bFGF के संशोधन के माध्यम से इंजीनियर थर्मोस्टेबल bFGF प्रोटीन इस चुनौती का समाधान करता है। यह प्राकृतिक bFGF की शक्तिशाली जैविक गतिविधि को बनाए रखता है जबकि बढ़ी हुई तापीय स्थिरता प्राप्त करता है, एक विस्तृत तापमान सीमा में संरचनात्मक अखंडता और प्रोटीन गतिविधि को बनाए रखता है।

मानव भ्रूण मूल कोशिकाs (hESCs) और प्रेरित प्लुरिपोटेंट स्टेम सेल (iPSCs) में सभी दैहिक कोशिका प्रकारों में विभेदित होने की क्षमता होती है। hESCs और iPSCs की इन विट्रो संस्कृति के दौरान, स्टेम सेल प्लुरिपोटेंसी को बनाए रखने के लिए bFGF आवश्यक है। शोध से पता चलता है कि थर्मोस्टेबल bFGF के साथ संवर्धित hESCs तेजी से अविभेदित कॉलोनियों का निर्माण करते हैं (चित्र 1A) और दीर्घकालिक संस्कृति के दौरान बढ़ी हुई प्रसार दर प्रदर्शित करते हैं (चित्र 1B)। आगे के अध्ययनों से पता चलता है कि थर्मोस्टेबल bFGF प्लुरिपोटेंसी मार्करों (जैसे, OCT4, SOX2, KLF4) की अभिव्यक्ति को बनाए रखते हुए hESC प्रसार को बढ़ावा देता है, जो hESC प्लुरिपोटेंसी को संरक्षित करने की इसकी क्षमता को प्रमाणित करता है - सेल संस्कृति अनुप्रयोगों के लिए एक महत्वपूर्ण विशेषता।

1.पीएनजी

चित्र 1 थर्मोस्टेबल बनाम वाइल्ड-टाइप bFGF का hESC प्रसार पर प्रभाव (DOI: 10.3390/biology12060888)

उत्तर: विभिन्न bFGF वेरिएंट के साथ फीडर-मुक्त संवर्धन स्थितियों के तहत दूसरे दिन hESCs की वृद्धि स्थिति।

बी: फीडर-मुक्त परिस्थितियों में डब्ल्यूटी-बीएफजीएफ (जंगली-प्रकार) या टीएस-बीएफजीएफ (थर्मोस्टेबल) के साथ निरंतर संवर्धन के दौरान कोशिका वृद्धि दर की तुलना।

उत्पाद प्रक्षेपण

bFGF गर्मी प्रतिरोध-अंग्रेजी (1).png

पुनः संयोजक मानव bFGF प्रोटीन (हीट स्टेबल)

उत्पाद की विशेषताएँ

  • थर्मास्टाइबल
  • उच्च शुद्धता (>90%)
  • उच्च गतिविधि
  • कम एंडोटॉक्सिन (
  • बाँझ
  • माइकोप्लाज्मा-मुक्त

उत्पाद प्रदर्शन

2.पीएनजी

चित्र 2 पुनर्संयोजी मानव bFGF प्रोटीन (थर्मोस्टेबल) का SDS-PAGE विश्लेषण, कम करने की स्थितियों के तहत, शुद्धता > 90% के साथ।

3.जेपीजी

चित्र 3 37°C पर 72 घंटे के बाद, T&L का उत्पाद 100 ng/mL पर प्रतिस्पर्धियों की तुलना में 6 गुना अधिक सक्रियता बरकरार रखता है।

4.पीएनजी

चित्र 4 भंडारण तापमान (-80°C, 4°C, 37°C) बढ़ने पर प्रतिस्पर्धी गतिविधि कम हो जाती है, जबकि T&L का उत्पाद सभी तापमानों पर स्थिर गतिविधि बनाए रखता है।

आवेदन परिदृश्य

जब इसे iPSC संवर्धन माध्यम में मिलाया जाता है, तो माध्यम प्रतिस्थापन हर 2 दिन में किया जा सकता है।

जैसा कि चित्र 5 में दिखाया गया है, T&L के रिकॉम्बिनेंट ह्यूमन bFGF प्रोटीन (GMP-TL901) और थर्मोस्टेबल bFGF को iPSC कल्चर के लिए AMMS® प्लुरिपोटेंट स्टेम सेल मीडियम (AS-35) पर लगाया गया। थर्मोस्टेबल bFGF से पूरित मीडियम में, नियमित bFGF की तुलना में प्रतिदिन या हर दूसरे दिन मीडियम परिवर्तन से कॉलोनी की संख्या और आकार में उल्लेखनीय सुधार हुआ। उल्लेखनीय रूप से, थर्मोस्टेबल bFGF के साथ प्रतिदिन और हर दूसरे दिन प्रोटोकॉल के बीच सेल व्यवहार्यता में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं दिखा, जो लागत-कुशल iPSC कल्चर के लिए इसकी उपयुक्तता को प्रमाणित करता है।

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टी एंड एल बायोटेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड सेल और के लिए अपस्ट्रीम, जीएमपी-ग्रेड कच्चे माल और अभिकर्मकों के अनुसंधान और विकास पर ध्यान केंद्रित करती है पित्रैक उपचार (CGT)। हम अपने व्यापक उत्पाद और सेवा पेशकशों के माध्यम से CGT ग्राहकों के लिए संपूर्ण समाधान प्रदान करने के लिए प्रतिबद्ध हैं। हमारे उत्पादों में शामिल हैं कोशिका पृथक्करण और सक्रियण चुंबकीय मोती, यूकेरियोटिक/प्रोकैरियोटिक पुनः संयोजक प्रोटीन, सीरम-मुक्त माध्यम, कोशिका संवर्धन किट, और अधिक।

हम एक शोध एवं विकास प्रयोगशाला और 3,200 वर्ग मीटर का GMP-स्तर का स्वच्छ कार्यशाला संचालित करते हैं। इन सुविधाओं में सेल पृथक्करण चुंबकीय मनका विकास, यूकेरियोटिक और प्रोकैरियोटिक प्रोटीन अभिव्यक्ति इंजीनियरिंग और सीरम-मुक्त माध्यम विकास के लिए प्लेटफ़ॉर्म शामिल हैं। हम ISO 13485 और ISO 9001 गुणवत्ता प्रबंधन प्रणाली मानकों दोनों का पालन करते हैं। इसके अतिरिक्त, हमारे कुछ उत्पादों में FDA DMF फाइलिंग है।