मैक्ससॉर्टिन® CD14 आइसोलेशन किट

स्टॉक: स्टॉक में
मॉडल: TL-625KIT

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उत्पाद विवरण

संघटन

नाम	अनुच्छेद संख्या	विनिर्देश	जमा करने की अवस्था	शेल्फ जीवन
मैक्ससॉर्टिन® CD14 पृथक्करण चुंबकीय मोती	टीएल-625	1×10⁹ कुल कोशिकाओं के लिए 2 एमएल	2 - 8 डिग्री सेल्सियस	6 महीने
मैक्ससॉर्टिन® सेल सॉर्टिंग बफर	एमएस-बीएफ100	100 एमएल	2 - 8 डिग्री सेल्सियस	12 महीने
मैक्ससॉर्टिन® एल-सेपरेशन कॉलम	एमएस-सीएल01	1 टुकड़ा	10 - 35 डिग्री सेल्सियस	12 महीने

उत्पाद विवरण

प्रतिक्रियाशील प्रजातियां: इंसान

चुंबकीय मनका एंडोटॉक्सिन:

चुंबकीय मनका उपस्थिति: भूरा तरल

उपयोग का उद्देश्य

MaxSortin® CD14 पृथक्करण किट का उपयोग मानव परिधीय रक्त मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं (PBMCs) से मोनोसाइट्स और मैक्रोफेज को समृद्ध करने या हटाने के लिए किया जा सकता है। कोशिकाओं के साथ नैनोस्केल CD14 पृथक्करण चुंबकीय मोतियों को इनक्यूबेट करके, CD14+ कोशिकाओं की छंटाई की जा सकती है। PBMCs के साथ इनक्यूबेट करने के लिए MaxSortin® CD14 पृथक्करण चुंबकीय मोतियों का उपयोग करके और फिर चुंबकीय पृथक्करण करके, CD14+ कोशिकाओं को अलग और समृद्ध किया जा सकता है, जो CD14+ कोशिकाओं को हटाने या शुद्ध करने में भूमिका निभाता है।

उपयोग हेतु निर्देश

प्रयोगात्मक प्रक्रिया

1. मानव पीबीएमसी को 1% मानव सीरम एल्ब्यूमिन (एचएसए) युक्त पीबीएस बफर में फिर से निलंबित करें। गिनती के लिए एक नमूना लें और 1×10⁷ कोशिकाओं को 1.5 एमएल ईपी ट्यूब में स्थानांतरित करें। फिर 5 मिनट के लिए 1500 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज करें।
2. सतह पर तैरने वाले तरल को हटा दें, कोशिकाओं को पुनः निलंबित करने के लिए 80 μL मैक्ससॉर्टिन® सेल सॉर्टिंग बफर लें, 20 μL मैक्ससॉर्टिन® CD14 पृथक्करण चुंबकीय मोती डालें, अच्छी तरह से मिलाएं और फिर उन्हें 15 मिनट के लिए ऊष्मायन के लिए 2 - 8 °C पर रेफ्रिजरेटर में रखें।
3. मैक्ससॉर्टिन® एल-सेपरेशन कॉलम लें और इसे चुंबकीय-सक्रिय सेल सॉर्टिंग (एमएसीएस) सॉर्टर पर रखें, और इसे 1 एमएल मैक्ससॉर्टिन® सेल सॉर्टिंग बफर से दो बार धो लें।
4. 2 - 8 °C पर रेफ्रिजरेटर से ऊष्मायन पूरा कर चुके नमूने को बाहर निकालें, 1 mL मैक्ससॉर्टिन® सेल सॉर्टिंग बफर डालें, 5 मिनट के लिए 1500 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज करें, और सुपरनेटेंट को त्याग दें।
5. कोशिकाओं को फिर से लटकाने के लिए 1 एमएल मैक्ससॉर्टिन® सेल सॉर्टिंग बफर डालें, सैंपल को सेपरेशन कॉलम में डालें। जब यह प्राकृतिक रूप से बाहर निकल जाए, तो मैक्ससॉर्टिन® सेल सॉर्टिंग बफर को दो भागों में डालें, हर बार 1 एमएल। 15 एमएल ट्यूब में अपशिष्ट को इकट्ठा करें।
6. जब सारा MaxSortin® सेल सॉर्टिंग बफर बाहर निकल जाए, तो MACS सॉर्टर से सेपरेशन कॉलम को हटा दें और इसे दूसरे नए 15 mL सेंट्रीफ्यूज ट्यूब में रख दें। सेपरेशन कॉलम में 3 mL MaxSortin® सेल सॉर्टिंग बफर डालें और सेपरेशन कॉलम के साथ आने वाले पिस्टन का इस्तेमाल करके लिक्विड को सीधे बाहर धकेलें।
7. एकत्रित द्रव युक्त 15 एमएल सेंट्रीफ्यूज ट्यूब को क्षैतिज सेंट्रीफ्यूज में रखें और 5 मिनट के लिए 1500 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज करें।
8. अपकेन्द्रण के बाद, सतह पर तैरनेवाला पदार्थ डालें, कोशिकाओं को पुनः निलंबित करने के लिए 1 × डुलबेको के फॉस्फेट-बफर सलाइन (डीपीबीएस) समाधान का 1 एमएल लें, कोशिकाओं की गिनती करें और प्रवाह साइटोमेट्री का पता लगाएं।

सावधानियां

1. कोशिकाओं के साथ चुंबकीय मोतियों को इनक्यूबेट करते समय, छंटाई दक्षता में सुधार करने के लिए उन्हें अच्छी तरह से मिश्रण करना आवश्यक है।

2. इस किट में शामिल बफर और सेपरेशन कॉलम का इस्तेमाल शुरुआती प्रयोग के लिए किया जा सकता है। यदि और भी प्रयोगात्मक ऑपरेशन शामिल हैं, तो कृपया MaxSortin® सेल सॉर्टिंग बफर (आर्टिकल नंबर: MS-BF100) और MaxSortin® L-सेपरेशन कॉलम (आर्टिकल नंबर: MS-CL01) को अलग से खरीदें।