AMMS®NK सेल कल्चर किट 3.0

प्राकृतिक किलर (एनके) सेल थेरेपी इम्यूनोथेरेपी में एक महत्वपूर्ण शोध केंद्र बन गई है, जो ऑन्कोलॉजी में उल्लेखनीय क्षमता प्रदर्शित करती है। एनके कोशिकाएं व्यापक स्पेक्ट्रम साइटोटोक्सिक गतिविधि वाली जन्मजात लिम्फोसाइट्स हैं, जो ट्यूमर कोशिकाओं, वायरस से संक्रमित कोशिकाओं और अन्य रोग संबंधी संस्थाओं को लक्षित करने में सक्षम हैं। पारंपरिक टी सेल थेरेपी से अलग, एनके कोशिकाएं बिना किसी पूर्व एंटीजन प्राइमिंग के तत्काल साइटोटोक्सिक प्रभाव डालती हैं, जिससे ट्यूमर एंटीजन विशिष्टता से स्वतंत्र तेजी से चिकित्सीय कार्रवाई संभव हो पाती है।

चित्र 1. एन.के. कोशिकाओं के ट्यूमर-रोधी तंत्र​​
(छवि स्रोत: एक्टा फार्मास्युटिका सिनिका)

एनके कोशिकाओं को विभिन्न स्रोतों से प्राप्त किया जा सकता है, जिसमें परिधीय रक्त, गर्भनाल रक्त (यूसीबी), प्रेरित प्लुरिपोटेंट स्टेम सेल (आईपीएससी) और एनके92 सेल लाइन शामिल हैं। अध्ययनों से पता चलता है कि यूसीबी-व्युत्पन्न एनके कोशिकाएं और पूर्वज उपलब्ध स्रोतों में सबसे अधिक प्रचुरता प्रदर्शित करते हैं। यूसीबी-व्युत्पन्न एनके कोशिकाओं का सरल फेनोटाइप ग्राफ्ट-बनाम-होस्ट रोग (जीवीएचडी) के जोखिम को कम करता है, जबकि उनकी व्यापक उपलब्धता और बेहतर प्रोलिफेरेटिव क्षमता यूसीबी को एनके सेल उत्पादन के लिए एक रणनीतिक स्रोत के रूप में स्थान देती है। उल्लेखनीय रूप से, पहले सीएआर-एनके क्लिनिकल परीक्षण में यूसीबी-व्युत्पन्न एनके कोशिकाओं का उपयोग किया गया था। इम्यूनोथेरेपी अनुसंधान में यूसीबी-एनके कोशिकाओं की बढ़ती प्रमुखता स्केलेबल, उच्च-शुद्धता वाले एनके सेल विस्तार को प्राप्त करने की महत्वपूर्ण चुनौती को रेखांकित करती हैकृत्रिम परिवेशीयनैदानिक ​​अनुवाद के लिए.

AMMS®NK सेल कल्चर किट 3.0 के लिए डिज़ाइन किया गया है पूर्व जीवताजा या क्रायोप्रिजर्व्ड गर्भनाल रक्त मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं (सीबीएमसी) से उच्च शुद्धता वाले एनके कोशिकाओं का सक्रियण और विस्तार। 2-लीटर कल्चर सिस्टम 90% से अधिक एनके शुद्धता के साथ 4-6 बिलियन कोशिकाओं की उपज प्राप्त करता है।

​​मुख्य विशेषताएं​​

• ​रासायनिक रूप से परिभाषित संस्कृति​
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• नमूना अनुकूलता: ताजा या क्रायोप्रिजर्व्ड यूसीबी सीबीएमसी​​
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• ज़ेनो-मुक्त फॉर्मूलेशन​​
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• उच्च उपज विस्तार: 90% से अधिक NK शुद्धता के साथ प्रति 2L सिस्टम में 4-6 बिलियन कोशिकाएं​

प्रदर्शन डेटा​

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चित्र 1. AMMS®NK सेल कल्चर किट 3.0 से संवर्धित UCB-व्युत्पन्न NK कोशिकाओं का कुल कोशिका विस्तार और व्यवहार्यता

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चित्र 2. AMMS®NK सेल कल्चर किट 3.0 से संवर्धित UCB-व्युत्पन्न NK कोशिकाओं में CD3-CD56+ कोशिका जनसंख्या प्रतिशत

सावधानियां
1、नमूना आवश्यकताएँ:
① यदि गर्भनाल रक्त (एंटीकोगुलेंट सहित) की रक्त मात्रा 80mL से कम है या अपेक्षित NK हार्वेस्ट अधिक है, तो ऑटोलॉगस प्लाज्मा के बजाय HPL का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है। HPL की कोशिका प्रसार दर ऑटोलॉगस प्लाज्मा की तुलना में लगभग 1-2 गुना अधिक है।
② रक्त संग्रहण के बाद ऑपरेशन 12 घंटे के भीतर पूरा किया जाना चाहिए।
③ यह अनुशंसा की जाती है कि जमे हुए नमूनों का जमने का घनत्व 2-4 x 10 7/mL हो, और रिकवरी के बाद व्यवहार्यता दर 80% से कम नहीं होनी चाहिए। गर्भनाल रक्त के नमूनों की खेती के दौरान ऑटोलॉगस प्लाज्मा के बजाय एचपीएल का उपयोग किया जाना चाहिए। परिधीय रक्त के नमूनों (हेपरिन सोडियम एंटीकोगुलेंट) के लिए ऑटोलॉगस प्लाज्मा का उपयोग किया जाना चाहिए, और ऑटोलॉगस प्लाज्मा के बजाय एचपीएल का भी उपयोग किया जा सकता है। 2、वाहिका घनत्व: बोतल का प्रारंभिक कोशिका घनत्व 1x10 6 कोशिका/mL होने की अनुशंसा की जाती है। जब अधिक लाल रक्त कोशिकाएँ होती हैं, तो कोशिका के बोतल घनत्व को प्रभावित करने से बचने के लिए प्रतिदीप्ति गणना या लाल रक्त कोशिका लिसिस गणना का चयन किया जाना चाहिए।
3、द्रव घनत्व: द्रव प्रतिस्थापन के बाद घनत्व 1x10 6/एमएल से कम नहीं होना चाहिए।
4、संस्कृति माध्यम का उपयोग:
① प्रत्येक अर्क से पहले संवर्धन माध्यम को कमरे के तापमान पर स्वाभाविक रूप से गर्म किया जाना चाहिए।
② पुनः तापमान के लिए कल्चर माध्यम की पूरी बोतल को 37℃ इनक्यूबेटर में न डालें, अन्यथा यह पूरक कल्चर माध्यम में साइटोकिन्स की निष्क्रियता को तेज कर देगा।
जीएमपी ग्रेड सीजीटी अभिकर्मक
③ तैयार पूर्ण माध्यम की शेल्फ लाइफ कम होती है, और इसे लगभग एक सप्ताह में उपयोग करने की सिफारिश की जाती है।
5、प्लाज्मा का उचित संचालन और संरक्षण: विवरण के लिए निर्देश देखें। सेंट्रीफ्यूज्ड प्लाज्मा साफ होना चाहिए।
6、कल्चर बैग का उपयोग: जब कल्चर की मात्रा 1L से कम हो, तो कल्चर बैग को रखने से पहले मोड़ना चाहिए। हमारी कंपनी के अनुशंसित मॉडल का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है।
7, ऊष्मायन समय: ए, कारक को एक फ्लैट बिस्तर में रात भर 4 ℃ के लिए ऊष्मायन किया जाना चाहिए। (आपातकालीन स्थिति में, 2 घंटे के लिए 37 ℃ ऊष्मायन करने का प्रयास करें)
8. संस्कृति के प्रारंभिक चरण के दौरान संस्कृति की बोतल को इच्छानुसार हिलाएं नहीं: अन्यथा, सक्रिय क्लोन समूह को तैरना आसान है, और कोटिंग कारक सेल समूह की सक्रियता को कम कर देगा।
9、कारकों का उपयोग: दीवार पर लटके हुए कारकों के नुकसान को कम करने के लिए, उपयोग से पहले सेंट्रीफ्यूजेशन करने की सिफारिश की जाती है। कारक युक्त शीशी को 50mL सेंट्रीफ्यूज ट्यूब में रखें और 1-2 मिनट के लिए 1000rpm पर सेंट्रीफ्यूज करें।
10、उपकरण रखरखाव: CO2 इनक्यूबेटर के तापमान और सांद्रता की नियमित रूप से जाँच करें, और समय पर फ़िल्टर बदलें। जैविक सुरक्षा कैबिनेट का नियमित रखरखाव और सफाई करें।
11. पर्यावरण निगरानी: स्वच्छ क्षेत्रों के पर्यावरण मानकों को सुनिश्चित करने के लिए प्राथमिक, मध्यम और उच्च दक्षता वाले फिल्टर को नियमित रूप से बदलें।
12, प्रयोगात्मक उपभोग्य सामग्रियों के निश्चित प्रकार और मॉडल: खेती के प्रभावों पर बदलते मॉडल और विनिर्देशों के प्रभाव का अग्रिम मूल्यांकन किया जाना चाहिए, जैसे कि 75 सेमी 2 संस्कृति की बोतलें और सेल संस्कृति बैग।