प्रतिक्रियाशील प्रजातियां: इंसान
अन्तर्जीवविष:
उपस्थिति: भूरा तरल
एक्टसेल टी सेल एक्टिवेशन रिएजेंट को एंटी-ह्यूमन सीडी 3 एंटीबॉडी और एंटी-ह्यूमन सीडी 28 एंटीबॉडी के साथ नैनोमैट्रिक्स को युग्मित करके संश्लेषित किया जाता है, और यह टी कोशिकाओं या पीबीएमसी (पेरिफेरल ब्लड मोनोन्यूक्लियर सेल्स) को धीरे-धीरे और कुशलतापूर्वक सक्रिय कर सकता है।
प्रयोगात्मक प्रक्रिया:
1.1 प्रयोग को 1:200 के टिटर पर संचालित करें। विशिष्ट योगात्मक मात्रा निम्न तालिका में दर्शाई गई है:
| संस्कृति प्लेट | अधिकतम संस्कृति मात्रा | कुल टी कोशिका संख्या | प्रति वेल में जोड़े गए टी सेल सक्रियण अभिकर्मक की मात्रा |
| 96 अच्छी तरह से | 0.2 एमएल | 0.3×10⁶ | 1 μएल |
| 48-अच्छी तरह से | 1 एमएल | 1×10⁶ | 5 μएल |
| 24-अच्छी तरह से | 2 एमएल | 2×10⁶ | 10 μएल |
| 12-अच्छी तरह से | 4 एमएल | 4×10⁶ | 20 μएल |
| 6-अच्छी तरह से | 5 एमएल | 5×10⁶ | 25 μएल |
1.2 1×10⁶ T कोशिकाओं को उदाहरण के रूप में लेना: 1×10⁶ T कोशिकाओं में 995 μL X-VIVOTM 15 माध्यम और 5 μL T कोशिका सक्रियण अभिकर्मक (जिसमें 200 IU/mL IL-2 हो) मिलाएँ। फिर उन्हें 2 दिनों के लिए 5% CO₂ के तहत 37 °C पर कल्चर करें।
1.3 2 - 3 दिनों तक कल्चर करने के बाद, 300g पर 10 मिनट के लिए सेंट्रीफ्यूज करें, सुपरनेटेंट को हटा दें, और टी सेल एक्टिवेशन रिएजेंट को हटाने के लिए 2 एमएल ताजा पूरा माध्यम डालें। फिर 5% CO₂ के तहत 37 °C पर कल्चर करना जारी रखें।
1.4 हर 2 दिन में, सेल सस्पेंशन को अच्छी तरह से पिपेट करके समान रूप से मिलाएं, ताजा पूर्ण माध्यम की मात्रा का 2 गुना जोड़ें (मूल मात्रा और पूरक मात्रा का अनुपात 1:2 है), और प्रवर्धन कारक की गणना करने के लिए कोशिकाओं की गिनती करें। फिर उन्हें 37 °C, 5% CO₂ इनक्यूबेटर में कल्चर करें। उदाहरण के लिए, यदि माध्यम को 4 दिन पर पूरक किया जाता है, और मूल मात्रा 2 एमएल है, तो 4 एमएल माध्यम जोड़ा जाना चाहिए, और अंतिम कुल मात्रा 6 एमएल होगी।
- टी कोशिका सक्रियण अभिकर्मक को कोशिकाओं के साथ इनक्यूबेट करते समय, सक्रियण दक्षता में सुधार करने के लिए उन्हें अच्छी तरह से मिश्रित करना आवश्यक है।
- टी कोशिका सक्रियण अभिकर्मक का टिटर 1:100 - 300 की सीमा के भीतर समायोजित किया जा सकता है।
- टी कोशिका सक्रियण अभिकर्मक को हटाने के लिए सेंट्रीफ्यूजिंग का समय ग्राहकों की आवश्यकताओं के अनुसार अनुकूलित किया जा सकता है।
यह उत्पाद केवल इन विट्रो कोशिका संवर्धन के लिए उपयुक्त है तथा इसका सीधे नैदानिक उपचार के लिए उपयोग नहीं किया जा सकता।