| Nome | Número de artigo | Especificación | Condicións de almacenamento | Vida útil |
| Esferas magnéticas de separación de CD4 MaxSortin® | TL-623 | 2 mL para 1×10⁹ células totais | 2 - 8 °C | 6 meses |
| Tampón de clasificación celular MaxSortin® | MS-BF100 | 100 ml | 2 - 8 °C | 12 meses |
| Columna de separación L MaxSortin® | MS-CL01 | 1 peza | 10 - 35 °C | 12 meses |
Especies reactivasHumano
Endotoxina de esfera magnética:
Aspecto da esfera magnéticaLíquido marrón
O kit de separación de CD4 MaxSortin® pódese empregar para clasificar células T CD4+ humanas. Mediante a incubación de esferas magnéticas de separación de CD4 a nanoescala con células, pódese conseguir a clasificación das células T CD4+. As esferas magnéticas de separación de CD4 a nanoescala incúbanse con células mononucleares de sangue periférico (PBMC) e logo sométense a separación magnética, o que permite a separación e o enriquecemento das células T CD4+, desempeñando un papel na purificación das células T CD4+ e sendo aplicable á produción de produtos de terapia celular.
1. Resuspender as PBMC humanas en tampón PBS que contén un 1 % de albumina sérica humana (HSA). Tomar unha mostra para a súa contaxe e transferir 1×10⁷ células a un tubo EP de 1,5 mL. Despois, centrifugar a 1500 rpm durante 5 minutos.
2. Desbotar o sobrenadante, coller 80 μL de tampón de clasificación celular MaxSortin® para resuspender as células, engadir 20 μL de esferas magnéticas de separación de CD4, mesturar ben e despois colocalas nun frigorífico a 2-8 °C para incubar durante 15 minutos.
3. Colle a columna de separación L MaxSortin® e colócaa no clasificador de células activadas magnéticamente (MACS) e enxáugaa dúas veces con 1 mL de tampón de clasificación celular MaxSortin®.
4. Sacar a mostra que completou a incubación do frigorífico a 2-8 °C, engadir 1 mL de solución MACS, centrifugar a 1500 rpm durante 5 minutos e descartar o sobrenadante.
5. Engadir 1 mL de tampón de clasificación celular MaxSortin® para resuspender as células e engadir a mostra á columna de separación. Despois de que flúa de forma natural, engadir o tampón de clasificación celular MaxSortin® en dúas porcións, 1 mL cada vez. Recoller o efluente nun tubo de centrífuga de 15 mL.
6. Despois de que todo o tampón de clasificación celular MaxSortin® se esgote, retire a columna de separación do clasificador MACS e colóquea noutro tubo de centrífuga novo de 15 mL. Engada 3 mL de tampón de clasificación celular MaxSortin® á columna de separación e use o pistón que vén coa columna de separación para expulsar o líquido directamente.
7. Coloque o tubo de centrífuga de 15 mL que contén o líquido recollido nunha centrífuga horizontal e centrifugue a 1500 rpm durante 5 minutos.
8. Despois da centrifugación, verte o sobrenadante, colle 1 mL de solución salina tamponada con fosfato de Dulbecco (DPBS) 1× para resuspender as células, contalas e realizar a detección por citometría de fluxo.
Ao incubar as esferas magnéticas con células, é necesario mesturalas completamente para mellorar a eficiencia da clasificación.
