| Nom | Numéro d'article | Spécification | Conditions de stockage | Durée de conservation |
| Billes magnétiques de séparation CD4 MaxSortin® | TL-623 | 2 mL pour 1 × 10⁹ cellules totales | 2 - 8 °C | 6 mois |
| Tampon de tri cellulaire MaxSortin® | MS-BF100 | 100 ml | 2 - 8 °C | 12 mois |
| Colonne de séparation MaxSortin® L | MS-CL01 | 1 pièce | 10 - 35 °C | 12 mois |
Espèces réactives: Humain
Endotoxine à billes magnétiques:
Aspect des billes magnétiques: Liquide brun
Le kit de séparation MaxSortin® CD4 permet de trier les lymphocytes T CD4+ humains. L'incubation de billes magnétiques nanométriques de séparation CD4 avec des cellules permet de trier les lymphocytes T CD4+. Ces billes sont incubées avec des cellules mononucléaires du sang périphérique (PBMC), puis soumises à une séparation magnétique. Cette opération permet la séparation et l'enrichissement des lymphocytes T CD4+, contribuant ainsi à leur purification et à la production de produits de thérapie cellulaire.
1. Remettre en suspension les PBMC humains dans un tampon PBS contenant 1 % d'albumine sérique humaine (HSA). Prélever un échantillon pour le comptage et transférer 1 × 10⁷ cellules dans un tube EP de 1,5 ml. Centrifuger ensuite à 1 500 tr/min pendant 5 minutes.
2. Jetez le surnageant, prenez 80 μL de tampon de tri cellulaire MaxSortin® pour remettre les cellules en suspension, ajoutez 20 μL de billes magnétiques de séparation CD4, mélangez bien puis placez-les dans un réfrigérateur à 2 - 8 °C pour une incubation de 15 minutes.
3. Prenez la colonne de séparation MaxSortin® L et placez-la sur le trieur de cellules activé magnétiquement (MACS), puis rincez-la deux fois avec 1 ml de tampon de tri cellulaire MaxSortin®.
4. Retirez l'échantillon qui a terminé l'incubation du réfrigérateur à 2 - 8 °C, ajoutez 1 mL de solution MACS, centrifugez à 1500 tr/min pendant 5 minutes et jetez le surnageant.
5. Ajouter 1 mL de tampon de tri cellulaire MaxSortin® pour remettre les cellules en suspension, puis verser l'échantillon dans la colonne de séparation. Après écoulement naturel, ajouter le tampon de tri cellulaire MaxSortin® en deux fois, 1 mL à chaque fois. Recueillir l'effluent dans un tube à centrifuger de 15 mL.
6. Une fois le tampon de tri cellulaire MaxSortin® écoulé, retirez la colonne de séparation du trieur MACS et placez-la dans un nouveau tube à centrifuger de 15 ml. Ajoutez 3 ml de tampon de tri cellulaire MaxSortin® dans la colonne de séparation et utilisez le piston fourni pour expulser le liquide directement.
7. Placer le tube à centrifuger de 15 ml contenant le liquide collecté dans une centrifugeuse horizontale et centrifuger à 1500 tr/min pendant 5 minutes.
8. Après centrifugation, versez le surnageant, prenez 1 ml de solution saline tamponnée au phosphate de Dulbecco (DPBS) 1× pour remettre les cellules en suspension, comptez les cellules et effectuez la détection par cytométrie de flux.
Lors de l'incubation des billes magnétiques avec les cellules, il est nécessaire de les mélanger soigneusement pour améliorer l'efficacité du tri.
