Kit d'isolement MaxSortin® CD14

Stock : En stock
Modèle : TL-625KIT

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Détails du produit

Composition

Nom	Numéro d'article	Spécification	Conditions de stockage	Durée de conservation
Billes magnétiques de séparation MaxSortin® CD14	TL-625	2 mL pour 1 × 10⁹ cellules totales	2 - 8 °C	6 mois
Tampon de tri cellulaire MaxSortin®	MS-BF100	100 ml	2 - 8 °C	12 mois
Colonne de séparation MaxSortin® L	MS-CL01	1 pièce	10 - 35 °C	12 mois

Détails du produit

Espèces réactives: Humain

Endotoxine à billes magnétiques:

Aspect des billes magnétiques: Liquide brun

Utilisation prévue

Le kit de séparation MaxSortin® CD14 permet d'enrichir ou d'éliminer les monocytes et les macrophages des cellules mononucléaires du sang périphérique (PBMC) humaines. L'incubation de billes magnétiques nanométriques de séparation CD14 avec les cellules permet de trier les cellules CD14+. L'utilisation de billes magnétiques MaxSortin® de séparation CD14 avec les PBMC, puis la séparation magnétique, permettent de séparer et d'enrichir les cellules CD14+, contribuant ainsi à leur élimination ou à leur purification.

Mode d'emploi

Procédures expérimentales

1. Remettre en suspension les PBMC humains dans un tampon PBS contenant 1 % d'albumine sérique humaine (HSA). Prélever un échantillon pour le comptage et transférer 1 × 10⁷ cellules dans un tube Ep de 1,5 mL. Centrifuger ensuite à 1 500 tr/min pendant 5 minutes.
2. Jetez le surnageant, prenez 80 μL de tampon de tri cellulaire MaxSortin® pour remettre les cellules en suspension, ajoutez 20 μL de billes magnétiques de séparation MaxSortin® CD14, mélangez bien puis placez-les dans un réfrigérateur à 2 - 8 °C pour une incubation de 15 minutes.
3. Prenez la colonne de séparation MaxSortin® L et placez-la sur le trieur de cellules activé magnétiquement (MACS), puis rincez-la deux fois avec 1 ml de tampon de tri cellulaire MaxSortin®.
4. Retirez l'échantillon qui a terminé l'incubation du réfrigérateur à 2 - 8 °C, ajoutez 1 ml de tampon de tri cellulaire MaxSortin®, centrifugez à 1 500 tr/min pendant 5 minutes et jetez le surnageant.
5. Ajouter 1 mL de tampon de tri cellulaire MaxSortin® pour remettre les cellules en suspension, puis verser l'échantillon dans la colonne de séparation. Après écoulement naturel, ajouter le tampon de tri cellulaire MaxSortin® en deux fois, 1 mL à chaque fois. Recueillir l'effluent dans un tube de 15 mL.
6. Une fois le tampon de tri cellulaire MaxSortin® écoulé, retirez la colonne de séparation du trieur MACS et placez-la dans un nouveau tube à centrifuger de 15 ml. Ajoutez 3 ml de tampon de tri cellulaire MaxSortin® dans la colonne de séparation et utilisez le piston fourni pour expulser le liquide directement.
7. Placer le tube à centrifuger de 15 ml contenant le liquide collecté dans une centrifugeuse horizontale et centrifuger à 1500 tr/min pendant 5 minutes.
8. Après centrifugation, versez le surnageant, prenez 1 ml de solution saline tamponnée au phosphate de Dulbecco (DPBS) 1× pour remettre les cellules en suspension, comptez les cellules et effectuez la détection par cytométrie de flux.

Précautions

1. Lors de l'incubation des billes magnétiques avec les cellules, il est nécessaire de les mélanger soigneusement pour améliorer l'efficacité du tri.

2. Le tampon et la colonne de séparation inclus dans ce kit peuvent être utilisés pour l'expérience initiale. Si des opérations expérimentales supplémentaires sont nécessaires, veuillez acheter le tampon de tri cellulaire MaxSortin® (référence : MS-BF100) et la colonne de séparation MaxSortin® L (référence : MS-CL01) séparément.