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Kit d'isolation MaxSortin® CD138

Stock : En stock
Modèle : TL-811KIT

    Composition

     

    Nom Numéro d'article Spécification Conditions de stockage Durée de conservation
    Billes magnétiques de séparation MaxSortin® CD138 TL-811-1000 1 mL pour 1×10⁹ cellules totales 2 - 8 °C 6 mois
    Tampon de tri cellulaire MaxSortin® MS-BF100 100 ml 2 - 8 °C 12 mois
    Colonne de séparation MaxSortin® L MS-CL01 1 pièce 10 - 35 °C 12 mois

     

    Détails du produit

     

    Espèces réactives: Humain

    Endotoxine à billes magnétiques:

    Aspect des billes magnétiques: Liquide brun

     

    Utilisation prévue

    Les billes magnétiques de séparation MaxSortin® CD138 permettent de trier les cellules CD138+. Le tri des cellules CD138+ est obtenu en couplant des anticorps monoclonaux anti-CD138 humain sur les billes magnétiques, en les incubant avec les cellules, puis en effectuant une séparation magnétique.

     

    Mode d'emploi

    Procédures expérimentales

    1. Remettre en suspension l'échantillon mixte de cellules mononucléaires du sang périphérique contenant environ 10 % d'U266 dans un tampon PBS contenant 1 % d'albumine sérique humaine (HSA). Prélever un échantillon pour le comptage et transférer 1 × 10⁷ cellules dans un tube Ep de 1,5 mL. Centrifuger ensuite à 1 500 tr/min pendant 5 minutes.
    2. Jetez le surnageant, prenez 90 μL de solution tampon de tri cellulaire MaxSortin® pour remettre les cellules en suspension, ajoutez 10 μL de billes magnétiques de séparation MaxSortin® CD138, mélangez bien puis placez-les dans un réfrigérateur à 2 - 8 °C pour une incubation de 15 minutes.
    3. Prenez la colonne de séparation MaxSortin® L et placez-la sur le trieur de cellules activé magnétiquement (MACS), puis rincez-la deux fois avec 1 ml de tampon de tri cellulaire MaxSortin®.
    4. Retirez l'échantillon qui a terminé l'incubation du réfrigérateur à 2 - 8 °C, ajoutez 1 ml de tampon de tri cellulaire MaxSortin®, centrifugez à 1 500 tr/min pendant 5 minutes et jetez le surnageant.
    5. Ajouter 1 ml de tampon de tri cellulaire MaxSortin® pour remettre les cellules en suspension, puis déposer l'échantillon dans la colonne de séparation MaxSortin® L. Une fois l'échantillon s'écoulant naturellement, ajouter le tampon de tri cellulaire MaxSortin® en deux fois, 3 ml à chaque fois, pour laver les cellules adhérant à la colonne.
    6. Une fois le tampon de tri cellulaire MaxSortin® écoulé, retirez la colonne de séparation MaxSortin® L du trieur MACS et placez-la dans un tube à centrifuger de 15 ml (marquez-le correctement). Ajoutez 3 ml de tampon de tri cellulaire MaxSortin® dans la colonne de séparation MaxSortin® L et utilisez le piston pour expulser le liquide directement. Les cellules collectées sont les cellules CD138+.
    7. Comptez les cellules et effectuez une détection par cytométrie de flux.

     

    Précautions

    1. Lors de l'incubation des billes magnétiques avec les cellules, il est nécessaire de les mélanger soigneusement pour améliorer l'efficacité du tri.

    2. Lorsque la proportion de cellules CD138+ est inférieure à 3 %, il est recommandé d'ajouter 5 μL de billes magnétiques. Lorsque la proportion de cellules CD138+ est supérieure à 3 %, il est recommandé d'ajouter 10 μL de billes magnétiques.

    3. Ce produit ne peut pas être utilisé pour un traitement clinique.