Espèces réactives: Humain
Endotoxine:
Apparence: Liquide brun
Le réactif d'activation des cellules T ActCel est synthétisé en couplant une nanomatrice avec un anticorps anti-CD3 humain et un anticorps anti-CD28 humain, et il peut activer en douceur et efficacement les cellules T ou les PBMC (cellules mononucléaires du sang périphérique).
Procédures expérimentales:
1.1 Réaliser l'expérience à un titre de 1:200. Les quantités d'ajout spécifiques sont indiquées dans le tableau suivant :
| Plaque de culture | Volume de culture maximal | Nombre total de lymphocytes T | Volume de réactif d'activation des cellules T ajouté par puits |
| 96 puits | 0,2 ml | 0,3×10⁶ | 1 μL |
| 48 puits | 1 mL | 1×10⁶ | 5 μL |
| 24 puits | 2 ml | 2×10⁶ | 10 μL |
| 12 puits | 4 ml | 4×10⁶ | 20 μL |
| 6 puits | 5 ml | 5×10⁶ | 25 μL |
1.2 Prenons l'exemple de 1×10⁶ cellules T : ajoutez 995 μL de milieu X-VIVOTM 15 et 5 μL de réactif d'activation des cellules T (contenant 200 UI/mL d'IL-2) à 1×10⁶ cellules T. Cultivez-les ensuite à 37 °C sous 5 % de CO₂ pendant 2 jours.
1.3 Après 2 à 3 jours de culture, centrifuger à 300 g pendant 10 minutes, retirer le surnageant et ajouter 2 ml de milieu complet frais pour éliminer le réactif d'activation des lymphocytes T. Poursuivre ensuite la culture à 37 °C sous 5 % de CO₂.
1.4 Tous les 2 jours, pipeter soigneusement la suspension cellulaire pour la mélanger uniformément, ajouter deux fois le volume de milieu complet frais (le rapport entre le volume initial et le volume supplémentaire est de 1:2) et compter les cellules pour calculer le facteur d'amplification. Les cultiver ensuite dans un incubateur à 37 °C et 5 % de CO₂. Par exemple, si le milieu est supplémenté le 4e jour et que le volume initial est de 2 ml, ajouter 4 ml de milieu, et le volume total final sera de 6 ml.
- Lors de l'incubation du réactif d'activation des cellules T avec des cellules, il est nécessaire de les mélanger soigneusement pour améliorer l'efficacité de l'activation.
- Le titre du réactif d'activation des cellules T peut être ajusté dans la plage de 1:100 à 300.
- Le temps de centrifugation pour éliminer le réactif d’activation des cellules T peut être optimisé en fonction des exigences du client.
Ce produit est uniquement applicable à la culture cellulaire in vitro et ne peut pas être utilisé directement pour un traitement clinique.