Leave Your Message

MaxSortin® CD4 isolatsioonikomplekt

Laos: Laos
Mudel: TL-623KIT

    Nimi Artikli number Spetsifikatsioon Säilitamistingimused Säilivusaeg
    MaxSortin® CD4 eraldusmagnetilised helmed TL-623 2 ml 1 × 10⁹ raku kohta 2–8 °C 6 kuud
    MaxSortin® rakkude sorteerimispuhver MS-BF100 100 ml 2–8 °C 12 kuud
    MaxSortin® L-eralduskolonn MS-CL01 1 tükk 10–35 °C 12 kuud

     

    Toote üksikasjad

     

    Reaktiivsed liigidInimene

    Magnetiliste helmeste endotoksiin

    Magnetiliste helmeste välimusPruun vedelik

     

    Ettenähtud kasutus

    MaxSortin® CD4 eralduskomplekti saab kasutada inimese CD4+ T-rakkude sorteerimiseks. CD4+ T-rakkude sorteerimine on võimalik nanoskaala CD4 eraldusmagnethelmeste inkubeerimise teel rakkudega. Nanoskaala CD4 eraldusmagnethelmesid inkubeeritakse perifeerse vere mononukleaarsete rakkudega (PBMC-dega) ja seejärel allutatakse magnetilisele eraldamisele, mis võimaldab CD4+ T-rakkude eraldamist ja rikastamist, mängides rolli CD4+ T-rakkude puhastamisel ja on rakendatav rakuteraapia toodete tootmisel.

     

    Kasutusjuhend

     

    Eksperimentaalsed protseduurid

    1. Resuspendeerige inimese PBMC-d PBS-puhvris, mis sisaldab 1% inimese seerumi albumiini (HSA). Võtke loendamiseks proov ja kandke 1 × 10⁷ rakku 1,5 ml EP-tuubi. Seejärel tsentrifuugige kiirusel 1500 p/min 5 minutit.
    2. Visake supernatant ära, võtke rakkude resuspendeerimiseks 80 μL MaxSortin® rakkude sorteerimispuhvrit, lisage 20 μL CD4 eraldusmagnetilisi helmeid, segage hoolikalt ja asetage need seejärel 15 minutiks inkubeerimiseks külmkappi temperatuuril 2–8 °C.
    3. Võtke MaxSortin® L-eralduskolonn, asetage see magnetaktiveeritud rakkude sorteerimise (MACS) sorteerijale ja loputage seda kaks korda 1 ml MaxSortin® rakkude sorteerimispuhvriga.
    4. Võtke külmkapist temperatuuril 2–8 °C välja proov, mille inkubatsioon on lõppenud, lisage 1 ml MACS-lahust, tsentrifuugige kiirusel 1500 p/min 5 minutit ja visake supernatant ära.
    5. Lisage rakkude resuspendeerimiseks 1 ml MaxSortin® rakkude sorteerimispuhvrit ja lisage proov eralduskolonni. Pärast loomulikku väljavoolu lisage MaxSortin® rakkude sorteerimispuhvrit kahes osas, kumbki 1 ml. Koguge väljavoolav vedelik 15 ml tsentrifuugituubi.
    6. Kui kogu MaxSortin® rakkude sorteerimispuhver on välja voolanud, eemaldage eralduskolonn MACS-sorteerijast ja asetage see uude 15 ml tsentrifuugituubi. Lisage eralduskolonni 3 ml MaxSortin® rakkude sorteerimispuhvrit ja suruge vedelik otse välja eralduskolonniga kaasasoleva kolvi abil.
    7. Asetage kogutud vedelikku sisaldav 15 ml tsentrifuugituub horisontaalsesse tsentrifuugi ja tsentrifuugige kiirusel 1500 p/min 5 minutit.
    8. Pärast tsentrifuugimist valage supernatant välja, võtke 1 ml 1× Dulbecco fosfaatpuhverdatud soolalahust (DPBS) rakkude resuspendeerimiseks, loendage rakud ja teostage voolutsütomeetria detekteerimine.

     

    Ettevaatusabinõud

    Magnetiliste helmeste ja rakkude inkubeerimisel on vaja neid sorteerimise efektiivsuse parandamiseks hoolikalt segada.