Rekombinantes menschliches TPO-Protein
Thrombopoietin (Tpo), auch bekannt als Megakaryozyten-Wachstums- und Entwicklungsfaktor (MGDF), ist ein Zytokin, das die Megakaryozytenproduktion und die Thrombozytenbildung reguliert. TPO wirkt früh in der Megakaryozyten-Linienbestimmung, fördert die Proliferation von Megakaryozyten-Vorläuferzellen und erhöht die Megakaryozyten-Ploidie. TPO beeinflusst jedoch nicht die Thrombozytenfreisetzung aus reifen Megakaryozyten [1].
TPO spielt eine zentrale Rolle bei der hämatopoetischenStammzellen(HSC)-Regulation (Abbildung 1). Studien zeigen, dass TPO-Signalwege in HSCs die Stammzellruhe aufrechterhalten, um deren Langlebigkeit zu erhalten, oder die HSC-Expansion während kritischer Ereignisse (z. B. nach einer Transplantation) fördern. In beiden Fällen moduliert TPO Zellzyklusübergänge. Der TPO-Mpl-Signalweg beeinflusst den mitochondrialen Stoffwechsel, und diese Stoffwechselregulation kann die Differenzierung der HSC-Linien beeinflussen. Darüber hinaus stimulieren TPO-Signalwege die Selbsterneuerung von HSCs, was ihr therapeutisches Potenzial für die Behandlung hämatopoetischer Erkrankungen mit eingeschränkter Stammzellfunktion, wie z. B. aplastischer Anämie, durch die Entwicklung TPO-mimetischer Medikamente unterstreicht.
In der Ex-vivo-Kultur von HSCs fördert TPO die Zellexpansion. Während TPO allein die Proliferation in Einzelzellkultursystemen nur minimal beeinflusst, steigert die Kombination mit SCF, IL-3 und IL-6 das klonale Wachstum von HSCs signifikant (Tabelle 1). Jüngste Fortschritte haben die Formulierung von Zytokin-Cocktails mit TPO weiter optimiert und so die Ergebnisse der HSC-Kultur verbessert [4,5].
Tabelle 1. Auswirkungen von TPO auf die HSC-Kolonienbildung in vitro [3].
Produkteigenschaften
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Hohe Reinheit
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Außergewöhnliche Bioaktivität
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Niedriges Endotoxin
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Steril, mykoplasmenfrei
Validierung der Produktleistung
Abbildung 2. SDS-PAGE-Analyse unter reduzierenden Bedingungen bestätigt >90 % Reinheit.
Abbildung 3. Mo7e-Zellproliferationstest: T&L-Produkt zeigt >5-fache Aktivität im Vergleich zu importierten Konkurrenzprodukten.
Produktinformationen
Synonyme: Thrombopoietin, C-mpl-Ligand, Megakaryozyten-Kolonie-stimulierender Faktor (MKCSF), MGDF, THCYT1, MPLLG
Zugang: P40225
Aminosäuresequenz: S22-L195 (P157N & R164N) Tag: His-Tag am C-Terminus
Expressionssystem: HEK293-Zellen. Molekulargewicht: 19,5 kDa
Reinheit: > 90 %, bestimmt durch SDS-PAGE
Endotoxin: Aktivität: Gemessen in einem Zellproliferationstest mit menschlichen megakaryozytischen Leukämiezellen vom Typ MO7e, entsprechend einer spezifischen Aktivität von ≥ 5,0×106 IU/mg.
Formulierung: Gefriergetrocknet aus sterilem PBS (pH 7,4), typischerweise ergänzt mit 6 % – 8 % Mannitol als Schutzmittel.
Stabilität und Lagerung
Lyophilisiertes Pulver: Nach der Rekonstitution bis zu 6 Monate stabil, wenn es unter sterilen Bedingungen bei -20 °C gelagert wird, oder 12 Monate bei -80 °C.
Rekonstitution: In sterilem Wasser für Injektionszwecke, physiologischer Kochsalzlösung oder PBS auflösen. Eine verdünnte Konzentration von ≥ 100 µg/ml aufrechterhalten.
Handhabung: Aliquotieren, um wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen zu vermeiden.
Beabsichtigte uns
Nur für Forschungs- und Herstellungszwecke.
Verweise
[1] de Graaf CA, Metcalf D. Thrombopoietin und hämatopoetische Stammzellen. Zellzyklus. 2011;10(10):1582-9. doi:10.4161/cc.10.10.15619.
[2] Nakamura-Ishizu A, Suda T. Vielfältige Rollen von Thrombopoietin in der Regulierung hämatopoetischer Stammzellen. Ann NY Acad Sci. 2020;1466(1):51-58. doi:10.1111/nyas.14169.
[3] Sitnicka E, et al. Die Wirkung von Thrombopoietin auf murine hämatopoetische Stammzellen. Blut. 1996;87:4998-5005. PMID:8652812.
[4] Pineault N, et al. Zytokineffekte auf die CD34+-Expansion im Nabelschnurblut. Zytotherapie. 2010;12:467-80.
[5] Ohmizono Y, et al. TPO synergisiert mit SCF/flt3-Liganden bei der Expansion von Nabelschnurblut-HSCs. Leukämie. 1997;11:524-30. doi:10.1038/sj.leu.2400588.