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Der Reparatur-Champion in Hochtemperaturumgebungen! T&L Biotechnology bringt offiziell das thermostabile bFGF-Protein der neuen Generation auf den Markt

30.04.2025

 

Der Basic Fibroblast Growth Factor (bFGF), ein Mitglied der Fibroblasten-Wachstumsfaktor-Familie, löst Signaltransduktionswege aus, indem er an Rezeptoren auf Zielzellen bindet und diese aktiviert.T-Zelle Oberflächen. bFGF reguliert die Proliferation verschiedener Zelltypen, darunter Endothelzellen, Neuronen, Chondrozyten, glatte Muskelzellen, Melanozyten und Adipozyten. Darüber hinaus ist bFGF an biologischen Prozessen wie Zellselbsterneuerung, Differenzierung, Entwicklung, Gewebereparatur und Regeneration beteiligt. Als entscheidender Faktor für das Zellwachstum wird bFGF häufig in der In-vitro-Kultur verschiedener Zelltypen eingesetzt.

Studien zeigen, dass bFGF unter physiologischen Bedingungen instabil ist und in Säugetierzellkulturen eine Halbwertszeit von etwa 8 Stunden aufweist. Die geringe thermische Stabilität und die kurze Halbwertszeit von bFGF führen zu Problemen in der Zellkultur und erfordern eine häufige Wachstumsfaktorergänzung oder einen täglichen Mediumwechsel. Das thermostabile bFGF-Protein, das durch Modifikation von natürlichem bFGF entwickelt wurde, löst diese Herausforderung. Es behält die starke biologische Aktivität von natürlichem bFGF bei und erreicht gleichzeitig eine verbesserte thermische Stabilität, wodurch die strukturelle Integrität und Proteinaktivität über einen breiten Temperaturbereich erhalten bleiben.

Menschlicher Embryo Stammzellens (hES-Zellen) und induzierte pluripotente Stammzellen (iPS-Zellen) besitzen das Potenzial, sich in alle somatischen Zelltypen zu differenzieren. Während der In-vitro-Kultur von hES- und iPS-Zellen ist bFGF für die Aufrechterhaltung der Pluripotenz von Stammzellen unerlässlich. Studien zeigen, dass mit thermostabilem bFGF kultivierte hES-Zellen schneller undifferenzierte Kolonien bilden (Abb. 1A) und bei Langzeitkultur erhöhte Proliferationsraten aufweisen (Abb. 1B). Weitere Studien zeigen, dass thermostabiles bFGF die Proliferation von hES-Zellen fördert und gleichzeitig die Expression von Pluripotenzmarkern (z. B. OCT4, SOX2, KLF4) aufrechterhält. Dies bestätigt seine Fähigkeit, die Pluripotenz von hES-Zellen zu erhalten – ein entscheidendes Merkmal für Zellkulturanwendungen.

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Abb. 1 Einfluss von thermostabilem bFGF im Vergleich zu Wildtyp-bFGF auf die hES-Proliferation (DOI: 10.3390/biology12060888)

A: Wachstumsstatus von hESCs am Tag 2 unter feederfreien Kulturbedingungen mit verschiedenen bFGF-Varianten.

B: Vergleich der Zellwachstumsraten während der kontinuierlichen Kultur mit WT-bFGF (Wildtyp) oder TS-bFGF (thermostabil) unter feederfreien Bedingungen.

Produkteinführung

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Rekombinantes menschliches bFGF-Protein (hitzestabil)

Produkteigenschaften

  • Thermostabil
  • Hohe Reinheit (>90%)
  • Hohe Aktivität
  • Niedriger Endotoxingehalt (
  • Steril
  • Mykoplasmenfrei

Produktleistung

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Abb. 2 SDS-PAGE-Analyse des rekombinanten menschlichen bFGF-Proteins (thermostabil) unter reduzierenden Bedingungen mit einer Reinheit von >90 %.

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Abb. 3: Nach 72 Stunden bei 37 °C behält das Produkt von T&L bei 100 ng/ml eine sechsmal höhere Aktivität als Konkurrenzprodukte.

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Abb. 4: Die Aktivität der Konkurrenzprodukte nimmt mit zunehmender Lagertemperatur (-80 °C, 4 °C, 37 °C) ab, während das Produkt von T&L bei allen Temperaturen eine stabile Aktivität beibehält.

Anwendungsszenario

Bei Zugabe zum iPSC-Kulturmedium kann der Mediumwechsel alle 2 Tage durchgeführt werden.

Wie in Abb. 5 dargestellt, wurden T&Ls rekombinantes humanes bFGF-Protein (GMP-TL901) und thermostabiles bFGF auf AMMS® Pluripotentes Stammzellmedium (AS-35) für die iPSC-Kultur angewendet. In mit thermostabilem bFGF angereichertem Medium verbesserte ein täglicher oder zweitägiger Mediumwechsel die Koloniezahl und -größe im Vergleich zu normalem bFGF signifikant. Bemerkenswerterweise zeigte die Zelllebensfähigkeit keinen signifikanten Unterschied zwischen täglichen und zweitägigen Protokollen mit thermostabilem bFGF, was dessen Eignung für eine kosteneffiziente iPSC-Kultur bestätigt.

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T&L Biotechnology Co., Ltd. konzentriert sich auf die Forschung und Entwicklung von vorgelagerten, GMP-gerechten Rohstoffen und Reagenzien für Zell- und Gentherapie (CGT). Wir bieten unseren Kunden Komplettlösungen durch unser umfassendes Produkt- und Serviceangebot. Zu unseren Produkten gehören Zelltrennung Und Aktivierungsmagnetkügelchen, eukaryotische/prokaryotische rekombinante Proteine, serumfreies Medium, Zellkultur-Kitsund mehr.

Wir betreiben ein Forschungs- und Entwicklungslabor und eine 3.200 Quadratmeter große GMP-zertifizierte Reinraumwerkstatt. Diese Einrichtungen umfassen Plattformen für die Entwicklung magnetischer Kügelchen zur Zellseparation, die Expressionstechnik eukaryotischer und prokaryotischer Proteine ​​sowie die Entwicklung serumfreier Medien. Wir erfüllen die Qualitätsmanagementsystem-Standards ISO 13485 und ISO 9001. Darüber hinaus verfügen einige unserer Produkte über FDA-DMF-Anmeldungen.