| Name | Artikelnummer | Spezifikation | Lagerbedingungen | Haltbarkeit |
| MaxSortin® CD8-Separationsmagnetkügelchen | TL-624 | 2 ml für 1×10⁹ Zellen insgesamt | 2 - 8 °C | 6 Monate |
| MaxSortin® Zellsortierungspuffer | MS-BF100 | 100 ml | 2 - 8 °C | 12 Monate |
| MaxSortin® L-Trennsäule | MS-CL01 | 1 Stück | 10 - 35 °C | 12 Monate |
Reaktive Spezies: Menschlich
Magnetisches Bead-Endotoxin:
Aussehen der magnetischen Perlen: Braune Flüssigkeit
Das MaxSortin® CD8 Separation Kit eignet sich zur Sortierung menschlicher CD8+ T-Zellen. Durch die Inkubation nanoskaliger magnetischer CD8-Separationskügelchen mit Zellen gelingt die Sortierung von CD8+ T-Zellen. Die nanoskaligen magnetischen CD8-Separationskügelchen werden mit peripheren mononukleären Blutzellen (PBMCs) inkubiert und anschließend einer magnetischen Trennung unterzogen. Dies ermöglicht die Trennung und Anreicherung von CD8+ T-Zellen, trägt zur Reinigung von CD8+ T-Zellen bei und ist für die Herstellung von Zelltherapieprodukten geeignet.
1. Humane PBMCs in PBS-Puffer mit 1 % humanem Serumalbumin (HSA) resuspendieren. Eine Probe zur Zählung entnehmen und 1 × 10⁷ Zellen in ein 1,5-ml-EP-Röhrchen überführen. Anschließend 5 Minuten bei 1500 U/min zentrifugieren.
2. Den Überstand verwerfen, 80 μl MaxSortin® Cell Sorting Buffer entnehmen, um die Zellen zu resuspendieren, 20 μl magnetische CD8-Separationskügelchen hinzufügen, gut vermischen und dann zur Inkubation für 15 Minuten in einen Kühlschrank bei 2–8 °C stellen.
3. Nehmen Sie die MaxSortin® L-Separation Column, platzieren Sie sie auf dem magnetisch aktivierten Zellsortierer (MACS) und spülen Sie sie zweimal mit 1 ml MaxSortin® Cell Sorting Buffer.
4. Nehmen Sie die Probe nach der Inkubation aus dem Kühlschrank bei 2–8 °C, geben Sie 1 ml MaxSortin® Cell Sorting Buffer hinzu, zentrifugieren Sie sie 5 Minuten lang bei 1500 U/min und verwerfen Sie den Überstand.
5. 1 ml MaxSortin® Cell Sorting Buffer hinzufügen, um die Zellen zu resuspendieren, und die Probe in die Trennsäule geben. Nach dem natürlichen Ausfluss MaxSortin® Cell Sorting Buffer in zwei Portionen zu je 1 ml hinzufügen. Das austretende Material in einem 15-ml-Zentrifugenröhrchen auffangen.
6. Nachdem der gesamte MaxSortin® Zellsortierpuffer abgelaufen ist, entfernen Sie die Trennsäule aus dem MACS-Sorter und setzen Sie sie in ein neues 15-ml-Zentrifugenröhrchen ein. Geben Sie 3 ml MaxSortin® Zellsortierpuffer in die Trennsäule und drücken Sie die Flüssigkeit mit dem mitgelieferten Kolben direkt heraus.
7. Legen Sie das 15-ml-Zentrifugenröhrchen mit der gesammelten Flüssigkeit in eine horizontale Zentrifuge und zentrifugieren Sie es 5 Minuten lang bei 1500 U/min.
8. Gießen Sie nach der Zentrifugation den Überstand ab, entnehmen Sie 1 ml 1 × Dulbeccos phosphatgepufferte Kochsalzlösung (DPBS), um die Zellen erneut zu suspendieren, zählen Sie die Zellen und führen Sie eine Durchflusszytometrie-Erkennung durch.
1. Beim Inkubieren der magnetischen Perlen mit Zellen ist es notwendig, diese gründlich zu mischen, um die Sortiereffizienz zu verbessern.
2. Der im Kit enthaltene Puffer und die Trennsäule können für das erste Experiment verwendet werden. Für weitere Experimente sind der MaxSortin® Zellsortierpuffer (Artikelnummer: MS-BF100) und die MaxSortin® L-Trennsäule (Artikelnummer: MS-CL01) separat erhältlich.
Dieses Produkt ist nur für die In-vitro-Zellkultur geeignet und kann nicht direkt für die klinische Behandlung verwendet werden.
