MaxSortin® CD138 Isolationskit

MaxSortin® CD138 Separation Magnetic Beads eignen sich zur Sortierung von CD138+-Zellen. Durch die Kopplung monoklonaler Anti-Human-CD138-Antikörper an die Magnetbeads, deren Inkubation mit Zellen und anschließende magnetische Trennung gelingt die Sortierung von CD138+-Zellen.

1. Resuspendieren Sie die gemischte Zellprobe der PBMCs mit ca. 10 % U266 in PBS-Puffer mit 1 % humanem Serumalbumin (HSA). Nehmen Sie eine Probe zur Zählung und überführen Sie 1 × 10⁷ Zellen in ein 1,5-ml-Ep-Röhrchen. Zentrifugieren Sie anschließend 5 Minuten lang bei 1500 U/min.
2. Den Überstand verwerfen, 90 μl MaxSortin® Cell Sorting Buffer-Lösung entnehmen, um die Zellen zu resuspendieren, 10 μl MaxSortin® CD138 Separation Magnetic Beads hinzufügen, gut vermischen und dann zur Inkubation für 15 Minuten in einen Kühlschrank bei 2 - 8 °C stellen.
3. Nehmen Sie die MaxSortin® L-Separation Column, platzieren Sie sie auf dem magnetisch aktivierten Zellsortierer (MACS) und spülen Sie sie zweimal mit 1 ml MaxSortin® Cell Sorting Buffer.
4. Nehmen Sie die Probe nach der Inkubation aus dem Kühlschrank bei 2–8 °C, geben Sie 1 ml MaxSortin® Cell Sorting Buffer hinzu, zentrifugieren Sie sie 5 Minuten lang bei 1500 U/min und verwerfen Sie den Überstand.
5. 1 ml MaxSortin® Zellsortierpuffer hinzufügen, um die Zellen zu resuspendieren, und die Probe in die MaxSortin® L-Trennsäule geben. Nach dem natürlichen Ausfließen MaxSortin® Zellsortierpuffer in zwei Portionen (je 3 ml) hinzufügen, um die an der Säule haftenden Zellen zu waschen.
6. Nachdem der gesamte MaxSortin® Zellsortierpuffer abgelaufen ist, entfernen Sie die MaxSortin® L-Trennsäule aus dem MACS-Sorter und legen Sie sie in ein 15-ml-Zentrifugenröhrchen (kennzeichnen Sie es entsprechend). Geben Sie 3 ml MaxSortin® Zellsortierpuffer in die MaxSortin® L-Trennsäule und drücken Sie die Flüssigkeit mit dem Kolben direkt heraus. Die gesammelten Zellen sind die CD138+-Zellen.
7. Zählen Sie die Zellen und führen Sie eine Durchflusszytometrie-Erkennung durch.