ActCel T-Zell-Aktivierungsreagenz

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Modell: TL-6001-1000

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Produktdetail

Technische Dokumentation

Produktdetails

Reaktive Spezies: Menschlich

Endotoxin:

Aussehen: Braune Flüssigkeit

Bestimmungsgemäße Verwendung

Das ActCel T-Zell-Aktivierungsreagenz wird durch Kopplung einer Nanomatrix mit Anti-Human-CD3-Antikörpern und Anti-Human-CD28-Antikörpern synthetisiert und kann T-Zellen oder PBMCs (Peripheral Blood Mononuclear Cells) sanft und effizient aktivieren.

Gebrauchsanweisung

Experimentelle Verfahren:
1.1 Der Versuch wird mit einem Titer von 1:200 durchgeführt. Die spezifischen Zugabemengen sind in der folgenden Tabelle aufgeführt:

Kulturplatte	Maximales Kulturvolumen	Gesamtzahl der T-Zellen	Volumen des pro Vertiefung hinzugefügten T-Zell-Aktivierungsreagenz
96-Well	0,2 ml	0,3×10⁶	1 μL
48-Well	1 ml	1×10⁶	5 μl
24-Well	2 ml	2×10⁶	10 μL
12-Well	4 ml	4×10⁶	20 μL
6-Well	5 ml	5×10⁶	25 μL

1.2 Am Beispiel von 1×10⁶ T-Zellen: Geben Sie 995 μL X-VIVOTM 15-Medium und 5 μL T-Zell-Aktivierungsreagenz (enthält 200 IU/mL IL-2) zu 1×10⁶ T-Zellen. Kultivieren Sie sie dann 2 Tage lang bei 37 °C unter 5 % CO₂.
1.3 Nach 2–3 Tagen Kultivierung 10 Minuten bei 300 g zentrifugieren, den Überstand entfernen und 2 ml frisches Komplettmedium hinzufügen, um das T-Zell-Aktivierungsreagenz zu entfernen. Anschließend die Kultivierung bei 37 °C unter 5 % CO₂ fortsetzen.
1.4 Pipettieren Sie die Zellsuspension alle zwei Tage gründlich, um sie gleichmäßig zu vermischen. Geben Sie die doppelte Menge an frischem Komplettmedium hinzu (Verhältnis von Originalvolumen zu Ergänzungsvolumen: 1:2) und zählen Sie die Zellen, um den Amplifikationsfaktor zu berechnen. Kultivieren Sie die Zellen anschließend in einem Inkubator bei 37 °C und 5 % CO₂. Wird das Medium beispielsweise am vierten Tag ergänzt und beträgt das Originalvolumen 2 ml, sollten 4 ml Medium hinzugefügt werden, sodass das endgültige Gesamtvolumen 6 ml beträgt.

Vorsichtsmaßnahmen

Beim Inkubieren des T-Zell-Aktivierungsreagenz mit Zellen ist es notwendig, diese gründlich zu mischen, um die Aktivierungseffizienz zu verbessern.
Der Titer des T-Zell-Aktivierungsreagenzes kann im Bereich von 1:100 – 300 eingestellt werden.
Die Zeit für die Zentrifugation zur Entfernung des T-Zell-Aktivierungsreagenzes kann je nach Kundenwunsch optimiert werden.