| Navn | Artikelnummer | Specifikation | Opbevaringsforhold | Holdbarhed |
| MaxSortin® CD4-separationsmagnetiske perler | TL-623 | 2 ml til 1×10⁹ celler i alt | 2-8 °C | 6 måneder |
| MaxSortin® cellesorteringsbuffer | MS-BF100 | 100 ml | 2-8 °C | 12 måneder |
| MaxSortin® L-separationskolonne | MS-CL01 | 1 stk. | 10-35 °C | 12 måneder |
Reaktive arterMenneske
Magnetisk perle endotoksin
Udseende af magnetiske perlerBrun væske
MaxSortin® CD4-separationskittet kan bruges til at sortere humane CD4+ T-celler. Ved at inkubere nanoskala CD4-separationsmagnetiske perler med celler kan sortering af CD4+ T-celler opnås. De nanoskala CD4-separationsmagnetiske perler inkuberes med perifere blodmononukleære celler (PBMC'er) og udsættes derefter for magnetisk separation, hvilket muliggør separation og berigelse af CD4+ T-celler, hvilket spiller en rolle i oprensningen af CD4+ T-celler og kan anvendes til produktion af celleterapiprodukter.
1. Resuspender humane PBMC'er i PBS-buffer indeholdende 1% humant serumalbumin (HSA). Tag en prøve til tælling, og overfør 1×10⁷ celler til et 1,5 ml EP-rør. Centrifuger derefter ved 1500 o/min i 5 minutter.
2. Kassér supernatanten, tag 80 μL MaxSortin® Cell Sorting Buffer for at resuspendere cellerne, tilsæt 20 μL CD4-separationsmagnetiske perler, bland godt, og anbring dem derefter i køleskab ved 2-8 °C til inkubation i 15 minutter.
3. Tag MaxSortin® L-separationskolonnen og placer den på den magnetisk aktiverede cellesorteringsanordning (MACS), og skyl den to gange med 1 ml MaxSortin® cellesorteringsbuffer.
4. Tag den inkuberede prøve ud af køleskabet ved 2-8 °C, tilsæt 1 ml MACS-opløsning, centrifuger ved 1500 rpm i 5 minutter, og kassér supernatanten.
5. Tilsæt 1 ml MaxSortin® Cell Sorting Buffer for at resuspendere cellerne, og tilsæt prøven til separationskolonnen. Når den er flydende ud naturligt, tilsættes MaxSortin® Cell Sorting Buffer i to portioner, 1 ml hver gang. Opsaml spildevandet i et 15 ml centrifugerør.
6. Når al MaxSortin® Cell Sorting Buffer er løbet ud, fjernes separationskolonnen fra MACS-sorteringsapparatet og placeres i et nyt 15 ml centrifugerør. Tilsæt 3 ml MaxSortin® Cell Sorting Buffer til separationskolonnen, og brug stemplet, der følger med separationskolonnen, til at skubbe væsken direkte ud.
7. Placer 15 ml-centrifugerøret med den opsamlede væske i en vandret centrifuge, og centrifuger ved 1500 o/min i 5 minutter.
8. Efter centrifugering hældes supernatanten fra, cellerne resuspenderes med 1 mL af 1× Dulbeccos fosfatbufferede saltvandsopløsning (DPBS). Tæl cellerne, og udfør flowcytometridetektion.
Når de magnetiske perler inkuberes med celler, er det nødvendigt at blande dem grundigt for at forbedre sorteringseffektiviteten.
