| Ime | Broj artikla | Specifikacija | Uslovi skladištenja | Rok trajanja |
| MaxSortin® magnetne kuglice za separaciju CD4 | TL-623 | 2 mL za 1×10⁹ ukupnih ćelija | 2 - 8 °C | 6 mjeseci |
| MaxSortin® pufer za sortiranje ćelija | MS-BF100 | 100 ml | 2 - 8 °C | 12 mjeseci |
| MaxSortin® L-kolona za separaciju | MS-CL01 | 1 komad | 10 - 35 °C | 12 mjeseci |
Reaktivne vrsteČovjek
Endotoksin magnetskih kuglica
Izgled magnetskih perliSmeđa tečnost
MaxSortin® CD4 Separation Kit može se koristiti za sortiranje ljudskih CD4+ T ćelija. Inkubacijom nanoskalnih magnetskih kuglica za separaciju CD4 sa ćelijama, može se postići sortiranje CD4+ T ćelija. Nanoskalne magnetske kuglice za separaciju CD4 se inkubiraju sa mononuklearnim ćelijama periferne krvi (PBMC), a zatim se podvrgavaju magnetskoj separaciji, što omogućava separaciju i obogaćivanje CD4+ T ćelija, igrajući ulogu u prečišćavanju CD4+ T ćelija i primjenjive su za proizvodnju proizvoda za ćelijsku terapiju.
1. Resuspendirajte ljudske PBMC u PBS puferu koji sadrži 1% humanog serumskog albumina (HSA). Uzmite uzorak za brojanje i prebacite 1×10⁷ ćelija u EP epruvetu od 1,5 mL. Zatim centrifugirajte na 1500 rpm tokom 5 minuta.
2. Odbacite supernatant, uzmite 80 μL MaxSortin® pufera za sortiranje ćelija da biste resuspendirali ćelije, dodajte 20 μL magnetskih kuglica za separaciju CD4, dobro promiješajte, a zatim ih stavite u frižider na 2 - 8 °C radi inkubacije 15 minuta.
3. Uzmite MaxSortin® L-separacijsku kolonu i stavite je na magnetski aktivirani sorter za ćelijsko sortiranje (MACS) i isperite je dva puta sa 1 mL MaxSortin® pufera za sortiranje ćelija.
4. Izvadite uzorak koji je završio inkubaciju iz hladnjaka na 2 - 8 °C, dodajte 1 mL MACS otopine, centrifugirajte na 1500 rpm tokom 5 minuta i odbacite supernatant.
5. Dodajte 1 mL MaxSortin® pufera za sortiranje ćelija da biste resuspendirali ćelije, a zatim dodajte uzorak u kolonu za separaciju. Nakon što uzorak prirodno isteče, dodajte MaxSortin® pufer za sortiranje ćelija u dva dijela, po 1 mL svaki put. Sakupite efluent u centrifugalnu epruvetu od 15 mL.
6. Nakon što sav MaxSortin® pufer za sortiranje ćelija isteče, izvadite kolonu za separaciju iz MACS sortera i stavite je u drugu novu centrifugalnu epruvetu od 15 mL. Dodajte 3 mL MaxSortin® pufera za sortiranje ćelija u kolonu za separaciju i koristite klip koji dolazi s kolonom za separaciju da biste direktno istisnuli tekućinu.
7. Stavite centrifugalnu epruvetu od 15 mL koja sadrži sakupljenu tekućinu u horizontalnu centrifugu i centrifugirajte na 1500 o/min tokom 5 minuta.
8. Nakon centrifugiranja, izlijte supernatant, uzmite 1 mL 1× Dulbeccoovog fosfatno puferiranog fiziološkog rastvora (DPBS) za resuspendiranje ćelija, prebrojite ćelije i provedite detekciju protočnom citometrijom.
Prilikom inkubacije magnetskih kuglica sa ćelijama, potrebno ih je dobro promiješati kako bi se poboljšala efikasnost sortiranja.
