Рэкамбінантны бялок ТПО чалавека

Тромбапаэтын (ТПО), таксама вядомы як фактар ​​росту і развіцця мегакарыяцытаў (MGDF), — гэта цытакін, які рэгулюе выпрацоўку мегакарыяцытаў і генерацыю трамбацытаў. ТПА дзейнічае на ранніх стадыях фарміравання мегакарыяцытнай лініі, спрыяючы праліферацыі клетак-папярэднікаў мегакарыяцытаў і павялічваючы плоіднасць мегакарыяцытаў. Аднак ТПА не ўплывае на вызваленне трамбацытаў са спелых мегакарыяцытаў [1].

ТПО гуляе ключавую ролю ў гематапаэзеСтвалавыя клеткіРэгуляцыя (ГСК) (Малюнак 1). Даследаванні паказваюць, што сігналізацыя ТПО ў ГСК падтрымлівае спакой ствалавых клетак для захавання іх даўгалецця або стымулюе пашырэнне ГСК падчас крытычных падзей (напрыклад, пасля трансплантацыі). У абодвух сцэнарыях ТПО мадулюе пераходы клеткавага цыклу. Сігнальны шлях ТПО-Mpl уплывае на метабалізм мітахондрыялаў, і гэтая метабалічная рэгуляцыя можа ўплываць на дыферэнцыяцыю лініі ГСК. Акрамя таго, сігналізацыя ТПО стымулюе самаабнаўленне ГСК, што падкрэслівае яго тэрапеўтычны патэнцыял для лячэння гематапаэтычных захворванняў, якія характарызуюцца парушэннем функцыі ствалавых клетак, такіх як аплястычная анемія, шляхам распрацоўкі лекаў, якія імітуюць ТПО.

У культуры ГСК ex vivo ТПА ўзмацняе экспансію клетак. Хоць сам па сабе ТПА мінімальна ўплывае на праліферацыю ў сістэмах культывавання аднаклетачных клетак, яго спалучэнне з SCF, IL-3 і IL-6 значна ўзмацняе клональны рост ГСК (табліца 1). Нядаўнія дасягненні дазволілі яшчэ больш аптымізаваць фармулёўкі цытакінавых кактэйляў з уключэннем ТПА для паляпшэння вынікаў культывавання ГСК [4,5].

Табліца 1. Уплыў ТПО на ўтварэнне калоній ГСК in vitro [3].

Асаблівасці прадукту

• Высокая чысціня

• Выключная біяактыўнасць

• Нізкі ўзровень эндатаксіну

• Стэрыльна, без мікаплазмы

Праверка прадукцыйнасці прадукту

Малюнак 2. Аналіз SDS-PAGE ў аднаўленчых умовах пацвярджае чысціню >90%.

Малюнак 3. Аналіз праліферацыі клетак Mo7e: прадукт T&L паказвае больш за 5-кратную актыўнасць у параўнанні з імпартнымі канкурэнтамі.

Інфармацыя пра прадукт
Сінонімы: тромбопаэтын, ліганд C-mpl, мегакарыяцытны калонійстымулюючы фактар ​​(MKCSF), MGDF, THCYT1, MPLLG
Нумар рэгістрацыі: P40225
Паслядоўнасць амінакіслот: S22-L195 (P157N і R164N) Метка: His-метка на C-канцы
Сістэма экспрэсіі: клеткі HEK293 Малекулярная маса: 19,5 кДа
Чысціня: > 90%, вызначаная метадам SDS-PAGE
Эндатаксін: Актыўнасць: вымерана ў аналізе праліферацыі клетак з выкарыстаннем мегакарыяцытных лейкацытных клетак чалавека MO7e, што адпавядае ўдзельнай актыўнасці ≥ 5,0×106 МЕ/мг.
Формула: ліяфілізаваны са стэрыльнага PBS (pH 7,4), звычайна з дадаткам 6% - 8% манітолу ў якасці ахоўнага агента.

Стабільнасць і захоўванне
Ліафілізаваны парашок: стабільны да 6 месяцаў пры захоўванні пры тэмпературы -20°C у стэрыльных умовах пасля растварэння або 12 месяцаў пры тэмпературы -80°C.
Развядзенне: Растварыце ў стэрыльнай вадзе для ін'екцый, фізіялагічным растворы або PBS. Падтрымлівайце канцэнтрацыю разведзенага раствора ≥ 100 мкг/мл.
Апрацоўка: падзяліць на аліквоты, каб пазбегнуць паўторных цыклаў замарожвання-размарозкі.

Прызначана нам
Толькі для даследчых і вытворчых мэтаў.

Спасылкі

[1] дэ Грааф К.А., Меткалф Д. Тромбапаэтын і гематапаэтычныя ствалавыя клеткі. Cell Cycle. 2011;10(10):1582-9. doi:10.4161/cc.10.10.15619.

[2] Накамура-Ісідзу А., Суда Т. Шматгранная роля тромбапаэтыну ў рэгуляцыі гематапаэтычных ствалавых клетак. Ann NY Acad Sci. 2020;1466(1):51-58. doi:10.1111/nyas.14169.

[3] Сітніцкая Э. і інш. Уплыў тромбопаэтыну на мышыныя гематапаэтычныя ствалавыя клеткі. Blood. 1996;87:4998-5005. PMID:8652812.

[4] Піно Н. і інш. Уплыў цытакінаў на экспансію CD34+ у пупавіннай крыві. Цытатэрапія. 2010;12:467-80.

[5] Ohmizono Y і інш. ТПО ўзаемадзейнічае з лігандам SCF/flt3 пры пашырэнні ГСК пупавіннай крыві. Лейкемія. 1997;11:524-30. doi:10.1038/sj.leu.2400588.