Leave Your Message
Катэгорыі прадуктаў
Рэкамендаваныя тавары

Камплект для ізаляцыі CD4 MaxSortin®

Наяўнасць: У наяўнасці
Мадэль: TL-623KIT

    Імя Нумар артыкула Спецыфікацыя Умовы захоўвання Тэрмін прыдатнасці
    Магнітныя шарыкі MaxSortin® для падзелу CD4 TL-623 2 мл на 1×10⁹ клетак 2 - 8 °C 6 месяцаў
    Буфер для сартавання клетак MaxSortin® MS-BF100 100 мл 2 - 8 °C 12 месяцаў
    L-падзяляльная калона MaxSortin® MS-CL01 1 штука 10 - 35 °C 12 месяцаў

     

    Падрабязнасці прадукту

     

    Рэактыўныя відыЧалавек

    Эндатаксін з магнітнымі шарыкамі

    Знешні выгляд магнітных шарыкаўКарычневая вадкасць

     

    Прызначэнне

    Набор для падзелу CD4 MaxSortin® можа выкарыстоўвацца для сартавання CD4+ Т-клетак чалавека. Сартаванне CD4+ Т-клетак можна дасягнуць шляхам інкубацыі нанамаштабных магнітных шарыкаў для падзелу CD4 з клеткамі. Нанамаштабныя магнітныя шарыкі для падзелу CD4 інкубуюцца з монануклеарнымі клеткамі перыферычнай крыві (PBMC), а затым падвяргаюцца магнітнай сепарацыі, што дазваляе аддзяляць і ўзбагачаць CD4+ Т-клеткі, адыгрываючы пэўную ролю ў ачыстцы CD4+ Т-клетак і прымяняючыся для вытворчасці прадуктаў клеткавай тэрапіі.

     

    Інструкцыя па ўжыванні

     

    Эксперыментальныя працэдуры

    1. Рэсуспендуйце чалавечыя PBMC у буферы PBS, які змяшчае 1% сыроватачнага альбуміна чалавека (HSA). Вазьміце ўзор для падліку і перанясіце 1×10⁷ клетак у прабірку EP аб'ёмам 1,5 мл. Затым цэнтрыфугуйце пры 1500 аб/мін на працягу 5 хвілін.
    2. Зліце супернатант, вазьміце 80 мкл буфера для сартавання клетак MaxSortin® для рэсуспендавання клетак, дадайце 20 мкл магнітных шарыкаў для падзелу CD4, добра змяшайце, а затым змясціце іх у халадзільнік пры тэмпературы 2-8 °C для інкубацыі на працягу 15 хвілін.
    3. Вазьміце калонку MaxSortin® L-Separation і змясціце яе на сартавальнік з магнітнай актывацыяй клетак (MACS) і двойчы прамыйце яе 1 мл буфера для сартавання клетак MaxSortin®.
    4. Дастаньце ўзор, які завяршыў інкубацыю, з халадзільніка пры тэмпературы 2–8 °C, дадайце 1 мл раствора MACS, цэнтрыфугуйце пры 1500 абаротаў у хвіліну на працягу 5 хвілін і выкіньце супернатант.
    5. Дадайце 1 мл буфера для сартавання клетак MaxSortin® для рэсуспендавання клетак, дадайце ўзор у калонку для падзелу. Пасля таго, як ён выцячэ натуральным чынам, дадайце буфер для сартавання клетак MaxSortin® двума порцыямі па 1 мл кожная. Збярыце элюент у цэнтрыфужную прабірку аб'ёмам 15 мл.
    6. Пасля таго, як увесь буфер для сартавання клетак MaxSortin® выцячэ, выміце калонку для падзелу з сартавальніка MACS і змясціце яе ў новую цэнтрыфужную прабірку аб'ёмам 15 мл. Дадайце 3 мл буфера для сартавання клетак MaxSortin® у калонку для падзелу і выкарыстоўвайце поршань, які пастаўляецца ў камплекце з калонкай для падзелу, каб выціснуць вадкасць непасрэдна вонкі.
    7. Змесціце прабірку для цэнтрыфугі аб'ёмам 15 мл з сабранай вадкасцю ў гарызантальную цэнтрыфугу і цэнтрыфугуйце пры 1500 абаротаў у хвіліну на працягу 5 хвілін.
    8. Пасля цэнтрыфугавання зліце супернатант, вазьміце 1 мл 1× раствора фасфатна-салявога буфера Дульбека (DPBS) для рэсуспендавання клетак, падлічыце клеткі і правядзіце дэтэктар з дапамогай праточнай цытаметрыі.

     

    Меры засцярогі

    Пры інкубацыі магнітных шарыкаў з клеткамі неабходна старанна іх змяшаць, каб палепшыць эфектыўнасць сартавання.