Камплект для ізаляцыі MaxSortin® CD14

Наяўнасць: У наяўнасці
Мадэль: TL-625KIT

Звяжыцеся з намі

Падрабязнасці прадукту

Склад

Імя	Нумар артыкула	Спецыфікацыя	Умовы захоўвання	Тэрмін прыдатнасці
Магнітныя шарыкі MaxSortin® для падзелу CD14	TL-625	2 мл на 1×10⁹ клетак	2 - 8 °C	6 месяцаў
Буфер для сартавання клетак MaxSortin®	MS-BF100	100 мл	2 - 8 °C	12 месяцаў
L-падзяляльная калона MaxSortin®	MS-CL01	1 штука	10 - 35 °C	12 месяцаў

Падрабязнасці прадукту

Рэактыўныя відыЧалавек

Эндатаксін з магнітнымі шарыкамі

Знешні выгляд магнітных шарыкаўКарычневая вадкасць

Прызначэнне

Набор для падзелу CD14 MaxSortin® можа выкарыстоўвацца для ўзбагачэння або выдалення манацытаў і макрафагаў з монануклеарных клетак перыферычнай крыві чалавека (PBMC). Сартаванне клетак CD14+ можна дасягнуць шляхам інкубацыі нанамаштабных магнітных шарыкаў для падзелу CD14 з клеткамі. Выкарыстоўваючы магнітныя шарыкі для падзелу CD14 MaxSortin® для інкубацыі з PBMC, а затым выконваючы магнітнае падзеленне, клеткі CD14+ можна аддзяліць і ўзбагаціць, што спрыяе выдаленню або ачыстцы клетак CD14+.

Інструкцыя па ўжыванні

Эксперыментальныя працэдуры

1. Рэсуспендуйце чалавечыя PBMC у буферы PBS, які змяшчае 1% сыроватачнага альбуміна чалавека (HSA). Вазьміце ўзор для падліку і перанясіце 1×10⁷ клетак у прабірку Ep аб'ёмам 1,5 мл. Затым цэнтрыфугуйце пры 1500 аб/мін на працягу 5 хвілін.
2. Зліце супернатант, вазьміце 80 мкл буфера для сартавання клетак MaxSortin® для рэсуспендавання клетак, дадайце 20 мкл магнітных шарыкаў MaxSortin® CD14 Separation Magnetic Beads, добра змяшайце, а затым змясціце іх у халадзільнік пры тэмпературы 2–8 °C для інкубацыі на працягу 15 хвілін.
3. Вазьміце калонку MaxSortin® L-Separation і змясціце яе на сартавальнік з магнітнай актывацыяй клетак (MACS) і двойчы прамыйце яе 1 мл буфера для сартавання клетак MaxSortin®.
4. Дастаньце ўзор, які завяршыў інкубацыю, з халадзільніка пры тэмпературы 2–8 °C, дадайце 1 мл буфера для сартавання клетак MaxSortin®, цэнтрыфугуйце пры 1500 аб/мін на працягу 5 хвілін і выкіньце супернатант.
5. Дадайце 1 мл буфера для сартавання клетак MaxSortin® для рэсуспендавання клетак, дадайце ўзор у калонку для падзелу. Пасля таго, як ён выцячэ натуральным чынам, дадайце буфер для сартавання клетак MaxSortin® двума порцыямі па 1 мл кожная. Збярыце выцякаючы раствор у прабірку аб'ёмам 15 мл.
6. Пасля таго, як увесь буфер для сартавання клетак MaxSortin® выцячэ, выміце калонку для падзелу з сартавальніка MACS і змясціце яе ў новую цэнтрыфужную прабірку аб'ёмам 15 мл. Дадайце 3 мл буфера для сартавання клетак MaxSortin® у калонку для падзелу і выкарыстоўвайце поршань, які пастаўляецца ў камплекце з калонкай для падзелу, каб выціснуць вадкасць непасрэдна вонкі.
7. Змесціце прабірку для цэнтрыфугі аб'ёмам 15 мл з сабранай вадкасцю ў гарызантальную цэнтрыфугу і цэнтрыфугуйце пры 1500 абаротаў у хвіліну на працягу 5 хвілін.
8. Пасля цэнтрыфугавання зліце супернатант, вазьміце 1 мл 1× раствора фасфатна-салявога буфера Дульбека (DPBS) для рэсуспендавання клетак, падлічыце клеткі і правядзіце дэтэктар з дапамогай праточнай цытаметрыі.

Меры засцярогі

1. Пры інкубацыі магнітных шарыкаў з клеткамі неабходна старанна іх змяшаць, каб палепшыць эфектыўнасць сартавання.

2. Буфер і калона для падзелу, якія ўваходзяць у склад гэтага набору, можна выкарыстоўваць для пачатковага эксперыменту. Калі патрабуецца правесці больш эксперыментальных аперацый, калі ласка, набудзьце буфер для сартавання клетак MaxSortin® (нумар артыкула: MS-BF100) і калону MaxSortin® L-Separation (нумар артыкула: MS-CL01) асобна.