مجموعة عزل MaxSortin® CD4

يمكن استخدام طقم فصل MaxSortin® CD4 لفرز خلايا CD4+ T البشرية. من خلال حضن حبيبات مغناطيسية نانوية لفصل CD4 مع الخلايا، يمكن فرز خلايا CD4+ T. تُحضن حبيبات مغناطيسية نانوية لفصل CD4 مع خلايا الدم المحيطية أحادية النواة (PBMCs)، ثم تُخضع للفصل المغناطيسي، مما يُمكّن من فصل خلايا CD4+ T وتنميتها، مما يُسهم في تنقية خلايا CD4+ T، ويُستخدم في إنتاج منتجات العلاج الخلوي.

١. أعد تعليق خلايا الدم المحيطية أحادية النواة البشرية في محلول PBS يحتوي على ١٪ من ألبومين مصل الدم البشري (HSA). خذ عينة للعد، ثم انقل ١ × ١٠⁷ خلية إلى أنبوب EP سعة ١.٥ مل. ثم افصلها بجهاز الطرد المركزي بسرعة ١٥٠٠ دورة في الدقيقة لمدة ٥ دقائق.
2. تخلص من السائل العلوي، خذ 80 ميكرولترًا من محلول فرز الخلايا MaxSortin® لإعادة تعليق الخلايا، وأضف 20 ميكرولترًا من حبيبات الفصل المغناطيسية CD4، واخلط جيدًا ثم ضعها في الثلاجة عند درجة حرارة 2 - 8 درجة مئوية للحضانة لمدة 15 دقيقة.
3. خذ عمود فصل MaxSortin® L وضعه على جهاز فرز الخلايا المنشطة مغناطيسيًا (MACS)، ثم اشطفه مرتين باستخدام 1 مل من محلول فرز الخلايا MaxSortin®.
4. خذ العينة التي أكملت فترة الحضانة من الثلاجة عند درجة حرارة 2 - 8 درجة مئوية، وأضف 1 مل من محلول MACS، وقم بطردها مركزيًا بسرعة 1500 دورة في الدقيقة لمدة 5 دقائق، وتخلص من السائل العلوي.
٥. أضف ١ مل من محلول فرز الخلايا MaxSortin® لإعادة تعليق الخلايا، ثم ضع العينة في عمود الفصل. بعد خروجها بشكل طبيعي، أضف محلول فرز الخلايا MaxSortin® على دفعتين، ١ مل في كل مرة. اجمع السائل في أنبوب طرد مركزي سعة ١٥ مل.
٦. بعد تدفق محلول فرز الخلايا MaxSortin® بالكامل، أخرج عمود الفصل من جهاز فرز MACS وضعه في أنبوب طرد مركزي جديد سعة ١٥ مل. أضف ٣ مل من محلول فرز الخلايا MaxSortin® إلى عمود الفصل، واستخدم المكبس المرفق لدفع السائل للخارج مباشرةً.
7. ضع أنبوب الطرد المركزي سعة 15 مل المحتوي على السائل المجمع في جهاز الطرد المركزي الأفقي وقم بتشغيله بسرعة 1500 دورة في الدقيقة لمدة 5 دقائق.
8. بعد الطرد المركزي، قم بتصفية السائل العلوي، ثم خذ 1 مل من محلول 1× Dulbecco's phosphate-buffered saline (DPBS) لإعادة تعليق الخلايا، وعد الخلايا وإجراء الكشف باستخدام مقياس التدفق الخلوي.