MaxSortin® CD4 ማግለል ስብስብ

የMaxSortin® CD4 መለያየት ኪት የሰው CD4+ ቲ ሴሎችን ለመደርደር ሊያገለግል ይችላል። በ nanoscale CD4 መለያየት መግነጢሳዊ ዶቃዎችን ከሴሎች ጋር በማፍለቅ የሲዲ4+ ቲ ሴሎችን መደርደር ይቻላል። የ nanoscale ሲዲ 4 መለያየት መግነጢሳዊ ዶቃዎች በፔሪፈራል ደም ሞኖኑክሌር ሴሎች (PBMCs) ተቀርፀዋል ከዚያም መግነጢሳዊ መለያየት ይደርስባቸዋል፣ ይህም የሲዲ4+ ቲ ሴሎችን መለየት እና ማበልፀግ ያስችላል፣ ሲዲ4+ ቲ ህዋሶችን በማጥራት ረገድ ሚና በመጫወት እና በሴል ቴራፒ ምርቶች ምርት ላይ ተፈጻሚ ይሆናል።

1. 1% የሰው ሴረም አልቡሚንን (HSA) የያዘውን የሰው ፒቢኤምሲዎች በPBS ቋት ውስጥ እንደገና ያቁሙ። ለመቁጠር ናሙና ወስደህ 1×10⁷ ሕዋሶችን ወደ 1.5ml EP ቱቦ ያስተላልፉ። ከዚያም ለ 5 ደቂቃዎች በ 1500 ሬፐብሊክ ሴንትሪፉል.
2. ሱፐርኔታንትን ያስወግዱ, ሴሎቹን እንደገና ለማቆም 80 μL የ MaxSortin® Cell Sorting Buffer ይውሰዱ, 20 μL የሲዲ 4 መለያየት መግነጢሳዊ ዶቃዎች ይጨምሩ, በደንብ ይደባለቁ እና ከዚያም በማቀዝቀዣ ውስጥ በ 2 - 8 ° ሴ ውስጥ ለ 15 ደቂቃዎች ለመራባት ያስቀምጡ.
3. የMaxSortin® L-Separation አምድ ወስደህ በማግኔት-አክቲቭ ሴል መደርደር (MACS) ላይ አስቀምጠው እና በ1 ሚሊር የMaxSortin® Cell Sorting Buffer ሁለት ጊዜ እጠቡት።
4. መፈልፈሉን ያጠናቀቀውን ናሙና ከማቀዝቀዣው ውስጥ በ2 - 8 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውሰዱ፣ 1 ሚሊር የ MACS መፍትሄ፣ ሴንትሪፉጅ በ 1500 ሩብ ደቂቃ ለ 5 ደቂቃዎች ይጨምሩ እና ከፍተኛውን ያስወግዱት።
5. ሴሎቹን ለማንጠልጠል 1 ml የMaxSortin® Cell Sorting Buffer ይጨምሩ፣ ናሙናውን በመለያየት አምድ ውስጥ ይጨምሩ። በተፈጥሮው ከወጣ በኋላ፣ MaxSortin® Cell Sorting Buffer በሁለት ክፍሎች በያንዳንዱ ጊዜ 1 ሚሊ ይጨምሩ። በ 15 ሚሊር ሴንትሪፉጅ ቱቦ ውስጥ ያለውን ፍሳሽ ይሰብስቡ.
6. ሁሉም የMaxSortin® የሕዋስ መደርደር ቋት ከፈሰሰ በኋላ የመለያያ ዓምዱን ከ MACS መደርደር አውጥተው በሌላ አዲስ 15 ml ሴንትሪፉጅ ቱቦ ውስጥ ያስቀምጡት። 3 ሚሊ የMaxSortin® የሕዋስ መደርደር ቋት ወደ መለያየት ዓምድ ያክሉ እና ፈሳሹን በቀጥታ ወደ ውጭ ለመግፋት ከመለያው አምድ ጋር የሚመጣውን ፒስተን ይጠቀሙ።
7. የተሰበሰበውን ፈሳሽ የያዘውን 15 ሚሊር ሴንትሪፉጅ ቱቦ ወደ አግድም ሴንትሪፉጅ እና ሴንትሪፉጅ በ 1500 ሩብ ደቂቃ ለ 5 ደቂቃዎች ያስቀምጡ.
8. ከሴንትሪፉግ (ሴንትሪፍ) በኋላ የሱፐርኔታንትን ያፈስሱ, 1 ሚሊ ሜትር የ 1 × Dulbecco's ፎስፌት-ቡፈርድ ሳላይን (DPBS) መፍትሄ ይውሰዱ ሴሎችን እንደገና ለማቆም, ሴሎቹን ለመቁጠር እና ፍሰት የሳይቶሜትሪ ምርመራን ያካሂዳሉ.